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中成药2025年第07期:灯盏细辛注射液通过抑制ROS/MPTP/VDAC1信号轴对OGD/R诱导的HT22细胞线粒体损伤的保护作用

来源:期刊VIP网 时间:


作者:杨露;陈思吟;马理园;孙家宜;罗开沛;孟宪丽;

单位:成都中医药大学中医药创新研究院;成都中医药大学附属眉山市中医院;成都中医药大学药学院/现代中药产业学院;

摘要:目的 探究灯盏细辛注射液对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤的HT22细胞线粒体的保护作用。方法 HT22细胞分为对照组、模型组及灯盏细辛注射液5、 10、 20μL/mL组。除对照组外,其余各组细胞均经OGD/R处理。CCK-8法检测细胞活性,倒置显微镜下观察细胞形态,微板法检测LDH活性,DCFH-DA、 MitoSOX探针评价细胞及线粒体ROS水平,激光共聚焦显微镜观察Mito-Tracker Red标记的线粒体表型,比色法检测ATP水平及Na~+/K~+-ATPase活性,JC-1染色检测MMP水平,流式细胞术检测MPTP开放程度,TUNEL染色检测细胞凋亡率,Western blot法检测细胞VDAC1、 Bax、 Bcl-2、 Cyto C、 cleaved Caspase3蛋白表达。结果 灯盏细辛注射液可升高HT22细胞活性(P<0.01),降低LDH水平(P<0.05),维持细胞正常形态,抑制细胞、线粒体ROS累积(P<0.05),减少线粒体碎片化表型转变,升高ATP水平、 Na~+/K~+-ATPase活性、 MMP水平(P<0.05)。此外,它还能抑制MPTP异常开放(P<0.01),降低细胞凋亡率及VDAC1、 Bax、 Cyto C、 cleaved Caspase3蛋白表达(P<0.05),升高Bcl-2蛋白表达(P<0.05)。结论 灯盏细辛注射液可有效缓解OGD/R诱导的线粒体表型转换及功能障碍,进而减少HT22细胞凋亡,其作用机制与抑制ROS/MPTP/VDAC1信号有关。

关键词:灯盏细辛注射液;;缺血性脑卒中;;氧糖剥夺/复氧;;神经元损伤;;线粒体功能失调;;凋亡

基金资助:国家自然科学基金(82304880,82274207);; 四川省自然科学基金(2023NSFSC1782);; 成都中医药大学“杏林学者”学科人才科研提升计划项目(BSH2021024)