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作者：张鼎;胡芷涵;周珂青;陈炜;秦红玲;向军军;胡跃强;
单位：广西中医药大学研究生院;上海中医药大学中药学院;广西中医药大学第一附属医院;
摘要：目的 探讨温肺降浊方对Aβ_(25-35)诱导BV-2细胞线粒体功能的影响。方法 通过Aβ_(25-35)诱导BV-2细胞建立阿尔茨海默病(AD)细胞模型，确定Aβ_(25-35)干预的最佳浓度和时间点，设置LFHP-1c组(抑制剂)和温肺降浊方含药血清组。CCK-8法检测最佳干预浓度和时间点，Transwell实验观察细胞迁移情况，Hoechst 33342染色观察细胞凋亡情况，免疫荧光法检测PGAM5、Drp1的阳性细胞表达情况，RT-qPCR法和Western blot法检测细胞PGAM5、Drp1、OPA1、Mfn1/2 mRNA和蛋白表达。结果 以终浓度5μmol/L的Aβ_(25-35)干预48 h为制备AD细胞模型的最佳条件，20%温肺降浊方含药血清干预48 h细胞活性最佳。与对照组比较，模型组细胞迁移数量减少，存在较多亮蓝色阳性凋亡细胞，PGAM5、Drp1阳性细胞数、mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),OPA1、Mfn1/2 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比较，各给药组细胞迁移数量增加，亮蓝色阳性凋亡细胞减少，PGAM5、Drp1阳性细胞数、mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),OPA1、Mfn1/2 mRNA和蛋白表达升高(P<0.05)。结论 温肺降浊方可以调控PGAM5-Drp1轴减轻AD模型细胞损伤，改善线粒体稳态平衡，从而提高认知水平，发挥脑保护效应。
关键词：温肺降浊方;;阿尔茨海默病;;Aβ_(25-35);;PGAM-Drp1轴;;线粒体稳态平衡;;BV-2细胞
基金资助：国家自然科学基金(82260904);; 国家中医药管理局高水平重点学科(ZYYZDXK-2023166);; 广西中医脑病临床研究中心项目(桂科AD20238028);; 广西中医药重点学科建设项目(GZXK-Z-20-13);; 广西中医药大学“歧黄工程”高层次人才团队(202410);广西中医药大学博士研究生创新项目(YCBXJ2023010)
