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作者:陈嘉婧;李航;赵淑娟;
单位:上海中医药大学中药研究所,国家中医药管理局中药新资源与品质评价重点研究室,中药标准化教育部重点实验室,上海市复方中药重点实验室;
摘要:目的 分析克隆丹参bZIP6(SmbZIP6)转录因子调控丹酚酸类成分生物合成的功能与分子机制。方法 以丹参无菌苗叶片cDNA为模板,克隆SmbZIP6基因序列;通过PlantCARE、PlantTFDB网站筛选出SmbZIP6的靶基因,并通过酵母单杂交、双荧光素酶、凝胶迁移实验验证靶基因;通过发根农杆菌LBA9402介导的遗传转化,获得SmbZIP6过表达(SmbZIP6-OE)和SmbZIP6抑制表达(SmbZIP6-RNAi)丹参毛状根进行功能研究;对SmbZIP6-RNAi丹参毛状根进行转录组学分析。结果 SmbZIP6可以直接结合并激活Sm4CL2的转录表达;SmbZIP6能促进迷迭香酸、丹酚酸B的积累,毛状根干重增加;SmbZIP6能抑制迷迭香酸的积累,促进丹酚酸B积累,毛状根干重减少;转录组分析表明,SmbZIP6-RNAi差异表达基因在苯丙素类化合物代谢通路显著富集。结论 SmbZIP6可能通过激活Sm4CL2的转录表达,调控丹酚酸类化合物的生物合成,并促进丹参毛状根干重的积累。
关键词:丹参;;转录因子;;丹酚酸;;生物合成;;SmbZIP6;;SmbZIP6-OE;;SmbZIP6-RNAi
基金资助:国家自然科学基金(81673540)