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作者:刘传龙;李志恒;叶子玉;江鹏;唐懿;刘东浩;王哲享;罗继;
单位:湖南省中西医结合医院;湖南中医药大学;
摘要:目的 探讨健步汤抗骨质疏松症(OP)的作用。方法 18只大鼠采取双侧卵巢摘除法构建OP模型,造模成功后随机分为模型组、仙灵骨葆组(0.27 g/kg)、健步汤组(15.75 g/kg),每组6只;另设空白组和假手术组,每组6只。连续给药90 d后,采用Micro-CT检测骨微结构变化,ELISA法检测大鼠血清骨形成标志物PINP、骨吸收标志物CTX-1和炎症因子TNF-α、IL-6水平,流式细胞术检测大鼠股骨组织细胞凋亡率,RT-qPCR法检测大鼠股骨组织PI3K、Akt、PTEN mRNA表达。采取地塞米松诱导MC3T3-E1细胞建立OP体外模型,分为空白组、模型组和健步汤含药血清低、中、高浓度(健步汤-L、M、H)组(10%、15%、20%含药血清),干预结束后,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测细胞PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、Bax、Bcl-2蛋白表达,RT-qPCR法检测细胞PI3K、Akt、BGP、Runx2、COL1a1 mRNA表达。结果 健步汤能增加OP大鼠骨密度、骨体积分数和骨小梁数量(P<0.05),升高PINP水平(P<0.05),降低CTX-1、TNF-α、IL-6水平(P<0.05),降低股骨组织中细胞凋亡率(P<0.05),降低PTEN mRNA表达(P<0.05),升高PI3K、Akt mRNA表达(P<0.05)。健步汤含药血清能增加MC3T3-E1细胞增殖活性(P<0.05),降低细胞凋亡率(P<0.05),升高p-PI3K、p-Akt、Bcl-2蛋白表达(P<0.05),降低Bax蛋白表达(P<0.05),升高PI3K、Akt、BGP、Runx2、COL1a1 mRNA表达(P<0.05)。结论 健步汤可能通过激活PI3K/Akt信号通路,促进MC3T3-E1细胞增殖和活性,减少细胞凋亡,同时增加骨密度并减轻机体炎症反应,从而发挥抗骨质疏松症的作用。
关键词:健步汤;;骨质疏松症;;骨密度;;细胞凋亡;;炎症反应;;PI3K/Akt信号通路
基金资助:湖南省自然科学基金(2024JJ9464);; 湖南省中医药管理局项目(B2024027);; 长沙市自然科学基金(kq2403133)