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作者：杨朝永;陈若楠;张若彤;孙楠桢;汪家骏;孙杰;
单位：石河子大学动物科技学院;
摘要：本文旨在探究gga-miR-3594-3p和APOBEC2在鸡原代成肌细胞增殖分化和快、慢肌纤维形成过程中的调控作用。首先通过双荧光素酶试验验证gga-miR-3594-3p和APOBEC2的靶向关系，随后在鸡原代成肌细胞中过表达和干扰gga-miR-3594-3p,CCK8检测gga-miR-3594-3p对鸡原代成肌细胞增殖的影响，同时利用qRT-PCR和Western Blot验证gga-miR-3594-3p对快、慢肌纤维蛋白生成的影响。结果显示：双荧光素酶报告检测证实gga-miR-3594-3p和APOBEC2存在靶向关系；在鸡原代成肌细胞增殖期过表达gga-miR-3594-3p极显著抑制成肌细胞增殖，同时APOBEC2、CCND1、CDK6表达极显著下调；干扰gga-miR-3594-3p极显著促进成肌细胞增殖；干扰APOBEC2与过表达gga-miR-3594-3p结果一致；在分化期过表达ggamiR-3594-3p极显著促进成肌分化基因MYOG、Myod、MYHC和慢肌基因TNNT1、TNNC1表达，快肌基因TNNC2、TNNT3表达极显著下调，APOBEC2蛋白表达下调，促进慢肌纤维蛋白表达，抑制快肌纤维蛋白表达，干扰gga-miR-3594-3p表达结果则相反；干扰APOBEC2与过表达gga-miR-3594-3p结果一致。综上，gga-miR-3594-3p调控APOBEC2抑制鸡原代成肌细胞增殖，并促进其分化，同时促进慢肌纤维蛋白生成，抑制快肌纤维蛋白生成。本研究结果为完善miRNAs介导的鸡胚胎期肌纤维形成的调控网络奠定了研究基础。
关键词：gga-miR-3594-3p;APOBEC2;鸡原代成肌细胞;快肌纤维;慢肌纤维;增殖;分化
基金资助：国家自然科学基金（31860641）
