来源：期刊VIP网 时间：
作者：张亚磊;胡曦文;方懿;姜浩然;荀文娟;
单位：海南大学热带农林学院;
摘要：本实验旨在研究吲哚-3-甲醇（I3C）在猪小肠上皮细胞（IPEC-J2）上激活芳香烃受体（AhR）通过相关信号通路来保护仔猪肠道以及缓解肠上皮细胞铁死亡，明确其对肠道损伤修复的作用，并探讨其对铁死亡的影响。分别使用0、5、10、25、100、250、500、1 000μmol/L的I3C预处理IPEC-J2细胞后，基于前期研究，向细胞培养体系中添加1μg/mL的LPS进行处理，评估细胞活力，依据检测结果，确定了在该条件下对细胞活力产生显著影响的I3C最佳浓度，即100μmol/L。将IPEC-J2细胞分为4组：对照组（CON组）、脂多糖组（LPS组）、LPS+I3C组（L+I组）和I3C组，CON组细胞不做处理，LPS组添加1μg/mL LPS,L+I组添加1μg/mL LPS和100μmol/L I3C,I3C组添加100μmol/L I3C，收集细胞和上清用于检测抗氧化能力和亚铁离子含量，采用实时荧光定量PCR检测相关基因mRNA相对表达量。结果表明：(1)添加100μmol/LI3C能够逆转LPS的损伤效果（P<0.05）；(2) I3C预处理后可缓解LPS导致的乳酸脱氢酶（LDH）以及丙二醛（MDA）含量的升高（P<0.05），并使谷胱甘肽（GSH）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、超氧化物歧化酶（SOD）和总抗氧化能力（T-AOC）升高（P<0.05），缓解了细胞的氧化应激损伤；(3) I3C预处理细胞后，可缓解LPS导致的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素（IL）-1β(IL-1β)以及IL-6的mRNA表达量升高（P<0.05），并使IL-10的mRNA表达量升高（P<0.05），减弱了LPS所诱导的细胞炎症反应；(4)与LPS组相比，I3C处理后，可使LPS引起的细胞中AhR、CYP1A1、Nrf2、NQO1、HO-1、GPX4、SLC7A11mRNA相对表达量降低趋势发生改变（P<0.05），并促进铁蛋白重链1(FerritinHeavy Chain 1,FTH1)及铁蛋白轻链（Ferritin Light Chain,FTL）mRNA相对表达量降低到正常范围（P<0.05），同时使细胞中的亚铁离子含量降低（P<0.05），这表明通过激活AhR可通过上调Nrf2/SLC7A11/GPX4通路降低细胞铁死亡的产生。综合以上所述，I3C可能通过激活IPEC-J2细胞中AhR，调控Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路，提高抗氧化酶活性、抑制铁死亡，缓解LPS诱导的猪小肠上皮细胞损伤。
关键词：吲哚-3-甲醇;脂多糖;IPEC-J2;铁死亡
基金资助：国家自然科学基金地区基金项目（32060757）
