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作者：孙雅雯;李伉;陈思颍;冷璇;王栋;庞云渭;
单位：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所;
摘要：本试验旨在研究不同玻璃化冷冻解冻方案对猪GV期卵母细胞冷冻效果的影响。以猪GV期卵母细胞为研究对象，研究不同冷冻方案（EPS1:NCSU-37+EG+PG+BSA+PVP+蔗糖；EPS2:PBS+EG+PG+BSA+PVP+蔗糖；EDFS:M199+EG+DMSO+FBS+蔗糖）对玻璃化冷冻卵母细胞解冻后2 h存活的影响；在此基础上，研究不同解冻方案（WS1:0.4、0.2、0.1、0.05 mol/L和0 mol/L蔗糖溶液；WS2:1、0.5、0.25 mol/L和0mol/L蔗糖溶液）对玻璃化冷冻卵母细胞解冻后存活和成熟的影响；利用透射电镜观察玻璃化冷冻对卵母细胞超微结构的损伤。结果表明，EPS1和EDFS组玻璃化冷冻卵母细胞解冻后2 h存活率高于EPS2组（P<0.05）；在EDFS组，WS1解冻方案获得的卵母细胞2 h存活率（WS1 vs WS2:66.2%vs. 49.8%）、42 h存活率（WS1vs WS2:37.8%vs.5.6%）和成熟率（WS1vs WS2:47.3%vs.6.7%）显著高于WS2解冻方案（P<0.05）；与新鲜组卵母细胞相比，玻璃化冷冻卵母细胞均出现透明带断裂、微绒毛减少或消失、脂滴碎裂并大量空泡化、线粒体嵴模糊等不同程度的超微结构损伤，但EDFS组卵母细胞透明带、微绒毛以及线粒体等结构的损伤程度比EPS1组卵母细胞均有所减轻。结果表明，EDFS+WS1的玻璃化冷冻解冻方案更适宜猪GV期卵母细胞的冷冻保存。
关键词：猪;卵母细胞;玻璃化冷冻;解冻;超微结构
基金资助：国家重点研发计划（2021YFD1200301）
