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作者:王超;刘鹏飞;
单位:滕州市中心人民医院胸外科;
摘要:目的 探讨蛇床子素(OST)对食管癌细胞增殖、凋亡和顺铂(CDDP)敏感性及Wnt/β-连环蛋白(catenin)信号通路的影响。方法 培养食管癌细胞Eca109,用浓度为0、20、40、80、160、320μg/ml OST处理食管癌细胞,检测细胞活性;将所有食管癌细胞分为对照组(Control组)、OST低、中、高浓度处理组(OST-L、-M、-H组)、OCT高浓度处理+Wnt激活剂氯化锂(OST-H+LiCl组);5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(Edu)检测细胞增殖;膜联蛋白Ⅴ-异硫氰酸荧光素(AnnexinⅤ-FITC)/碘化丙啶(PI)检测细胞凋亡;Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、细胞核增殖抗原标志物(Ki67)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解的胱天蛋白酶(C-caspase)-3、细胞色素(Cyt)C、Wnt1、β-catenin、GSK3β蛋白表达;使用OST与CDDP单独或共同处理CDDP耐药细胞Eca109/CDDP,将其分为Eca109/CDDP组、OST组、CDDP组、OST+CDDP组,检测各组细胞增殖、凋亡情况及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达。结果 选择浓度为40、80、160μg/ml OST进行后续实验;OST-L、-M、-H组较Control组细胞Edu阳性率及Ki67、CyclinD1、Wnt1、β-catenin表达明显降低,细胞凋亡率及Bax、C-caspase-3、CytC、GSK3β表达明显升高,其中OST-H组变化最显著(P<0.05);OST-H+LiCl组较OST-H组细胞Edu阳性率及Ki67、CyclinD1、Wnt1、β-catenin表达明显升高,细胞凋亡率及Bax、C-caspase-3、CytC、GSK3β表达明显降低(P<0.05);使用OST与CDDP单独或共同处理CDDP耐药细胞Eca109/CDDP后,OST组及CDDP组较Eca109/CDDP组细胞Edu阳性率及Wnt1、β-catenin表达明显降低,细胞凋亡率及GSK3β表达明显升高(P<0.05);OST+CDDP组较OST组及CDDP组细胞Edu阳性率及Wnt1、β-catenin表达明显降低,细胞凋亡率及GSK3β表达明显升高(P<0.05)。结论 OST可制食管癌细胞增殖,促进凋亡,提高顺铂敏感性,其作用机制与抑制Wnt/β-catenin通路有关。
关键词:蛇床子素;;Wnt/β-连环蛋白信号通路;;食管癌;;增殖;;凋亡;;顺铂敏感性
基金资助:济宁医学院校级科研项目(JYFC2019FKJ051)