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作者：谢佳秀;梁金行;何俊慧;李懿;周容妃;周桂丽;韦冬梅;刘丽敏;韦桂宁;李冬梅;
单位：广西中药质量标准研究重点实验室,广西壮族自治区中医药研究院;广西医科大学;
摘要：目的 基于转录组测序探究拟黑多刺蚁活性组分对胶质母细胞瘤T98G细胞生长的抑制作用。方法 采用CCK8法检测不同质量浓度拟黑多刺蚁活性组分干预24 h对T98G细胞活力的影响；克隆形成实验、Transwell实验、DNA损伤检测实验和RT-qPCR实验检测拟黑多刺蚁活性组分对T98G细胞的增殖、迁移、DNA损伤和修复能力的影响。拟黑多刺蚁活性组分处理T98G细胞后进行转录组测序，通过生物信息学分析获得拟黑多刺蚁的活性成分及关键靶基因，RT-qPCR检测相关基因mRNA表达。结果 拟黑多刺蚁活性组分作用T98G细胞的IC_(50)值为4.57 mg/mL。与对照组比较，给药组克隆形成数目和迁移率降低(P<0.05,P<0.01),T98G细胞DNA损伤增加(P<0.01),DNA损伤修复基因RAD50、MRE11表达降低(P<0.05,P<0.01)。转录组测序分析显示，与对照组比较，给药组有363个基因表达上调，1 006个基因表达下调。GO富集分析显示，差异基因主要参与细胞过程、代谢、免疫等反应调控。KEGG分析显示，差异基因主要参与Toll样受体信号通路、Nod样受体信号通路。生物信息学分析显示，拟黑多刺蚁活性组分抗胶质瘤的关键靶基因是F3、TLR4和LY96。RT-qPCR验证实验显示，拟黑多刺蚁活性组分能降低F3、TLR4、LY96 mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。结论 拟黑多刺蚁活性组分可抑制胶质母细胞瘤T98G细胞的增殖、迁移能力，诱导DNA损伤并抑制DNA损伤修复途径，其机制可能与抑制F3以及抑制Toll样受体信号通路有关。
关键词：拟黑多刺蚁;;胶质母细胞瘤;;DNA损伤修复;;转录组测序;;组织因子(F3);;Toll样受体
基金资助：国家自然科学基金(82460788);; 广西自然科学基金项目(2021GXNSFBA220024);; 广西科技基地和人才专项(桂科AD22035055);; 广西中医药重点学科建设项目(GZXK-Z-20-75)
