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作者：屈京龙;席俊;秦扬;杨硕;安帅兵;黄凯强;魏亚玲;
单位：河南工业大学粮油食品学院;
摘要：花生过敏蛋白Ara h 3广泛存在于各类花生制品中，少量摄入即可引发过敏反应，严重威胁花生过敏患者的健康。精准地识别Ara h 3便于开展后续免疫学检测，因此，制备高纯度、高特异性的抗体显得尤为重要。以花生脱脂粉为原料，通过HiTrap Q HP阴离子交换层析柱和HiLoad Superdex200 pg制备级分子筛层析柱，制备高纯度的花生致敏蛋白Ara h 3，将其与CNBr-activated SepharoseTM~(4B)进行偶联，利用不同洗脱液对血清样品中的非特异性及特异性物质进行分离，制备高纯度、高特异性的抗Ara h 3多克隆抗体。结果表明:Gly-HCl洗脱的蛋白质量浓度为0.6 mg/mL; SDSPAGE分析显示，多克隆抗体中的非特异性物质已被有效去除;免疫印迹和ELISA试验证明，纯化后的抗体仍具有较高的特异性，其效价达到1∶51 200。上述结果表明抗体成功纯化，为花生过敏原Ara h 3的检测研究奠定了基础。
关键词：Ara h 3;;柱层析;;多抗血清;;纯化
基金资助：国家自然科学基金面上项目(32372441)
