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作者：郑丽香;罗安凤;毕延震;陈矾;乔瑞敏;
单位：河南农业大学动物科技学院;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室;
摘要：实验旨在探究三丁酸甘油酯（Tributyrin,TB）对小鼠早期胚胎体外发育的作用。选择6周龄SPF级昆明雌鼠，分离小鼠卵母细胞并进行体外授精，选择胞质均匀、两原核的受精胚胎转移到添加不同浓度的TB(0、50、100、200μmol/L)培养基中培养并观察胚胎发育情况，96 h后统计囊胚率，筛选最佳TB浓度。结果显示：与对照组相比，50、200μmol/L组囊胚率差异不显著，100μmol/L组囊胚率提高（P<0.01），确定TB最佳浓度为100μmol/L，因此后续实验均用该浓度。设置对照组和TB处理组，利用DCFH-DA法检测小鼠胚胎活性氧（Reactive Oxygen Species,ROS）水平、JC-1染色法检测小鼠胚胎线粒体膜电位水平、ATP水平检测试剂盒检测小鼠胚胎ATP水平，通过实时荧光定量PCR检测小鼠胚胎中抗氧化基因GPX4和SOD2的相对表达量，使用免疫荧光法检测小鼠胚胎组蛋白乙酰化和DNA甲基化水平。结果显示：与对照组相比，添加100μmol/LTB组小鼠胚胎中ROS水平降低（P<0.05），线粒体膜电位水平（P<0.01）和ATP水平（P<0.001）升高，抗氧化基因GPX4(P<0.001)和SOD2(P<0.05)相对表达量升高，组蛋白乙酰化水平（P<0.001）和DNA甲基化水平（P<0.01）得到改善。由以上可知，在小鼠早期胚胎体外培养过程中添加100μmol/L TB促进了小鼠早期胚胎发育。
关键词：小鼠胚胎;;三丁酸甘油酯;;体外发育;;氧化应激;;组蛋白乙酰化;;DNA甲基化
基金资助：国家自然科学基金青年基金（32302748）;; 湖北省自然科学基金青年基金（2023AFB240）;; 湖北省农业关键核心技术攻关（HBNYHXGG2023-7）
