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作者：方巧玉;吴娴;王轲信;李昂扬;宋丹;王攀林;武永淑;李向臣;张亚南;
单位：浙江农林大学动物科技学院·动物医学院;浙江大学动物科学学院;浙江惠嘉生物科技有限责任公司;
摘要：本文旨在探究柑橘果胶多糖（Citrus Pectin Polysaccharide,CPP）对脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）诱导的IPEC-J2细胞炎症损伤的缓解作用。首先，利用LPS诱导建立IPEC-J2细胞炎症损伤模型；随后，分别使用不同浓度CPP处理IPEC-J2细胞炎症损伤模型，试验分为对照组、LPS组、LPS+0.5 mg/mL CPP组、LPS+1.0 mg/mL CPP组、LPS+2.0 mg/mL CPP组，处理24 h后，检测细胞活力，测定细胞跨膜电阻值（Trans-Epithelial Electrical Resistance,TEER）、细胞炎症因子的mRNA表达水平和分泌量；检测紧密连接蛋白和NF-κB/MAPK信号通路相关基因mRNA表达水平。结果显示：不同浓度CPP提高了受损细胞的活力及其TEER值（P<0.05）。在细胞炎症因子表达方面，相较于LPS组，高浓度CPP(2 mg/mL)下调了细胞炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8的mRNA表达水平（P<0.05）;ELISA结果表明，与LPS组相比，LPS+CPP共处理的3组TNF-α、IL-6、IL-8分泌水平均降低（P<0.05）。在紧密连接蛋白表达方面，qPCR结果显示，相比于LPS组，高浓度CPP(2.0 mg/mL)上调了LPS诱导细胞中Claudin-1和ZO-1的mRNA表达水平（P<0.05）。对于NF-κB/MAPK信号通路，与LPS组相比，LPS+1.0 mg/mL CP组和LPS+2.0 mg/mL CPP组均下调了TLR4、MyD88、NF-κB、JNK、p38、ERK的mRNA表达水平（P<0.05）。由以上可知，CPP可显著缓解LPS诱导的IPEC-J2细胞炎症反应以及屏障损伤，其机制可能与CPP抑制NF-κB/MAPK信号通路有关。
关键词：柑橘果胶多糖;;炎症;;紧密连接;;NF-κB/MAPK信号通路;;IPEC-J2细胞
基金资助：浙江大学动物分子营养学教育部重点实验室开放性课题（KLMAN202307）;; 浙江农林大学科研发展基金项目（2023LFR006）;浙江农林大学国家级大学生创新创业训练计划（202310341010,张亚南）
