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作者：谭露霖;李莉娜;韩雪;吴仙;王清峰;李亮;冯宇隆;
单位：贵州省农业科学院畜牧兽医研究所;
摘要：本试验旨在探究油脂对MODE-K肠上皮细胞增殖、凋亡、抗氧化能力、免疫及屏障功能的影响。采用细胞计数盒（CCK-8）法、流式细胞仪测定油脂对肠上皮细胞增殖的影响，PI染色分析油脂对肠上皮细胞凋亡的影响，酶标仪分析油脂对肠上皮细胞抗氧化因子、免疫因子的影响，基于qRT-PCR分析肠上皮细胞紧密连接蛋白、免疫因子、抗氧化因子、以及增殖和凋亡相关基因表达的影响。实验分为3个处理组，包括对照组、新鲜油脂组和氧化油脂组。结果表明：与对照组相比，新鲜油脂可短暂（6 h）促进肠上皮细胞生长（P<0.05）；新鲜油脂和氧化油脂均可降低24 h和48 h肠上皮细胞数量（P<0.05），抑制肠上皮细胞的活力；氧化油脂可增加DNA合成前期（G0/G1期）细胞数量（P<0.05），降低DNA合成后期（G2/M期）细胞数量（P<0.05），降低增殖因子周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、周期蛋白依赖性激酶3(CDK3)、G1/S-特异性周期蛋白-D1(CyclinD1)的基因表达水平（P<0.05），抑制肠上皮细胞增殖；氧化油脂可增强碘化丙啶（PI）染色荧光强度，增加肠上皮细胞中凋亡因子半光氨酸-天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)、半光氨酸-天冬氨酸蛋白酶8(Caspase8)、半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶9(Caspase9)的基因表达水平（P<0.05），促进肠上皮细胞凋亡；新鲜油脂和氧化油脂均可降低24 h肠上皮细胞中过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、总抗氧化能力（T-AOC）的活力（P<0.05），增加24 h和48 h肠上皮细胞中丙二醛（MDA）含量（P<0.05），氧化油脂降低抗氧化因子过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶1(SOD1)和谷胱甘肽过氧化物酶1(GPX1)基因表达水平（P<0.05），损伤肠上皮细胞抗氧化功能；新鲜油脂和氧化油脂均可增加肠上皮细胞中促炎因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和干扰素-γ(IFN-γ)含量（P<0.05），且氧化油脂可降低抗炎因子白细胞介素-10(IL-10)和白细胞介素-22(IL-22)含量（P<0.05），降低白细胞介素-22(IL-22)和增加白细胞介素-6(IL-6)基因表达水平（P<0.05），损伤肠上皮细胞免疫功能。与对照组相比，新鲜油脂和氧化油脂均可降低紧密连接蛋白Occludin和闭合小环蛋白-1(ZO-1)的基因表达水平（P<0.05），损伤肠上皮细胞屏障功能。由以上可知，新鲜油脂和氧化油脂均可抑制肠上皮细胞活力、损伤肠上皮细胞抗氧化、免疫和屏障功能，且氧化油脂可抑制肠上皮细胞增殖、促进其凋亡。
关键词：油脂;;肠上皮细胞;;增殖;;凋亡;;肠道健康
基金资助：国家自然科学基金地区项目（32060759）;; 贵州省农业科学院国基后补助项目（黔农科院国基后补助（2021）63号）;; 现代农业产业技术体系建设专项资金（CARS-41-Z07）
