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作者：郑璇;黄兰香;崔逸爽;吴亚男;洪紫谦;张梦诗;孙国贵;
单位：华北理工大学公共卫生学院;华北理工大学附属医院;
摘要：目的 探讨二氢杨梅素(dihydromyricetin, DMY)对食管鳞癌(Esophageal squamous cell carcinoma, ESCC)增殖和转移的影响及是否由LncRNA CASC9/miR-195-5p/E2F7轴介导。方法 采用梯度浓度(0、25、50、100μmol/L)的DMY处理ESCC细胞，以探究DMY对ESCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响。利用生物信息学手段预测了ESCC中LncRNA CASC9/miR-195-5p/E2F7轴之间是否存在相互作用。实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)实验检测细胞中LncRNA CASC9、miR-195-5p和E2F7的表达，RT-qPCR、蛋白免疫印迹(Western blot)和双荧光素酶报告基因实验进一步验证其调控关系。通过细胞计数试剂盒-8(Cell counting kit-8,CCK-8)、集落形成、划痕以及Transwell侵袭实验分别检测细胞活性、增殖、迁移以及侵袭能力。应用Western blot实验检测上皮间充质转化(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)标志物如E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达。结果 DMY可以显著抑制ESCC细胞增殖、迁移和侵袭。生物信息学分析及细胞水平验证发现LncRNA CASC9在ESCC中高表达，DMY处理后可通过下调ESCC细胞中LncRNA CASC9的表达水平，从而抑制ESCC细胞增殖、迁移和侵袭。此外，miR-195-5p在ESCC中表达下调，而E2F7表达上调。RT-qPCR、Western blot和双荧光素酶报告基因实验进一步证实LncRNA CASC9通过吸附miR-195-5p进而调控E2F7的表达。敲低E2F7可以逆转敲低miR-195-5p对ESCC细胞增殖、转移以及EMT进程的促进作用，而过表达E2F7可逆转过表达miR-195-5p产生的抑制作用。结论 DMY可通过LncRNA CASC9/miR-195-5p/E2F7轴抑制ESCC的增殖和转移。
关键词：二氢杨梅素;LncRNA CASC9;miR-195-5p;E2F7;食管鳞癌;转移
基金资助：国家自然科学基金项目(82172658)
