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作者：马宇慧;孟佳磊;齐璐瑶;刘愿;李笑笑;雷鸣;
单位：上海中医药大学附属第七人民医院;
摘要：目的 探讨牛蒡子苷元对脂多糖(LPS)联合三磷酸腺苷(ATP)刺激的RAW264.7细胞焦亡的保护作用及干预机制。方法 CCK8法检测不同浓度的牛蒡子苷元对RAW264.7细胞活力的影响；CCK8法检测牛蒡子苷元(20、40、80μmol/L)干预对LPS+ATP诱导的RAW264.7细胞活力的影响；乳酸脱氢酶(LDH)释放检测细胞膜损伤；ELISA法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(Interleukin, IL)-6和IL-1β的含量；蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测细胞内寡聚化结构域样受体蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、半胱天冬酶-1(Caspase-1)p20、Caspase-1 p45、GSDMD-N和GSDMD-FL蛋白的表达；正倒置荧光显微镜观察碘化丙啶(PI)染色阳性细胞数量。结果 牛蒡子苷元浓度小于160μmol/L时对细胞活性影响较小；牛蒡子苷元(20、40、80μmol/L)干预逆转了LPS+ATP诱导的细胞活力降低；牛蒡子苷元减少了LPS+ATP诱导的焦亡细胞LDH的释放以及PI阳性细胞数量；牛蒡子苷元抑制焦亡细胞分泌促炎细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β;牛蒡子苷元抑制焦亡细胞NLRP3、Caspase-1 p20、Caspase-1 p45、GSDMD-N和GSDMD-FL蛋白的表达，抑制NLRP3炎症小体的激活。结论 牛蒡子苷元抑制NLRP3炎症小体激活改善细胞焦亡，缓解炎症反应。
关键词：牛蒡子苷元;巨噬细胞;细胞焦亡;NLRP3炎症小体
基金资助：国家自然科学基金面上项目(82174189); 上海市浦东新区重点亚专科建设项目(PWzy2020-07); 上海市浦东新区中医高端人才引入工程项目(PDZY-2022-0701)
