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作者：成光宇;李盼;宋来辉;梁金玲;曹文轩;于澎;戴雨霖;刘佳;许天阳;
单位：长春中医药大学;
摘要：目的 分析淫羊藿(Epimedii folium)及其炮制品化学组成，并探究其提取物对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(Mouse embryonic preosteoblast cells, MC3T3-E1 cells)的增殖及成骨作用。方法 取10批淫羊藿，分别加工炮制成羊脂油炙淫羊藿和盐炙淫羊藿各10批，利用高效液相色谱法(High performance liquid chromatography, HPLC)测定样品中黄酮类成分含量，并结合液相色谱指纹图谱及多元统计分析方法，探究淫羊藿中黄酮类化合物在炮制前后变化规律；建立地塞米松(Dexamethasone, DEX)诱导的MC3T3-E1细胞的成骨抑制模型，通过测定细胞中碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, ALP)、骨保护素(Osteoprotegerin, OPG)和骨钙素(Osteocalcin, OCN)的表达量来评价淫羊藿及其炮制品的抗骨质疏松效果，进一步探讨淫羊藿及其炮制品抗骨质疏松作用不同可能存在的原因。结果 建立淫羊藿及其炮制品HPLC指纹图谱，并对指纹图谱进行相似度评价，识别出共有峰16个；聚类分析结果将朝藿定A、朝藿定B和朝藿定C归为一类，淫羊藿苷和宝藿苷I归为一类；各黄酮含量的极坐标气泡图显示初级黄酮苷(朝藿定A、朝藿定B和朝藿定C)含量在炮制后整体减少，次级黄酮苷(淫羊藿苷和宝藿苷I)含量在炮制后整体增加；抗骨质疏松活性数据表明，淫羊藿不同炮制品均具有一定的成骨增殖作用，其中淫羊藿盐炙品对DEX抑制的成骨细胞活性增强作用最为明显。结论 采用指纹图谱相似度分析和聚类分析对5个黄酮类成分含量的差异进行分析，从而初步探索了淫羊藿炮制前后黄酮类成分的变化规律。结合其提取物对MC3T3-E1细胞增殖及成骨能力的影响，发现淫羊藿经盐炙后淫羊藿苷含量增加，对DEX引起的MC3T3-E1细胞成骨抑制的增殖作用显著增强，提示淫羊藿苷可能是淫羊藿不同炮制品抗骨质疏松临床疗效不同的物质基础，为进一步探索淫羊藿炮制原理奠定基础。
关键词：淫羊藿;黄酮类化合物;指纹图谱;聚类分析;骨质疏松
基金资助：吉林省科技发展计划项目(20210204035YY,20230204034YY,YDZJ202201ZYTS205)
