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作者：方舟;李光第;余资江;
单位：贵州医科大学基础医学院人体解剖学教研室;贵州医科大学附属医院;
摘要：目的 探讨穿心莲内酯调节Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白(KEAP)1/核转录因子E2相关因子(Nrf)2信号通路对过氧化氢(H_2O_2)诱导的软骨细胞损伤的影响。方法 将C-28/I2细胞分为对照组、模型组(100μmol H_2O_2)、穿心莲内酯低剂量组(100μmol H_2O_2+0.625μg/ml穿心莲内酯)、穿心莲内酯中剂量组(100μmol H_2O_2+1.250μg/ml穿心莲内酯)、穿心莲内酯高剂量组(100μmol H_2O_2+2.500μg/ml穿心莲内酯)。MTT法检测C-28/I2细胞增殖；流式细胞术检测C-28/I2细胞凋亡；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测C-28/I2细胞上清中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6水平；试剂盒检测C-28/I2细胞中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量；实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western印迹分别检测C-28/I2细胞中增殖核蛋白(PCNA)、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、KEAP1、Nrf2 mRNA及蛋白表达。结果 与对照组比较，模型组OD546 nm值、GSH-Px、SOD活性、PCNA、Nrf2 mRNA及蛋白表达降低，细胞凋亡率、TNF-α、IL-6水平、MDA含量、KEAP1、Bax mRNA及蛋白表达升高，差异显著(P<0.05);与模型组比较，穿心莲内酯低、中、高剂量组OD546值、GSH-Px、SOD活性、PCNA、Nrf2 mRNA及蛋白表达升高，细胞凋亡率、TNF-α、IL-6水平、MDA含量、KEAP1、Bax mRNA及蛋白表达降低，差异显著(P<0.05)。结论 穿心莲内酯可减轻H_2O_2诱导的软骨细胞损伤，该机制可能与调控KEAP1/Nrf2信号通路有关。
关键词：穿心莲内酯;;过氧化氢;;软骨细胞;;Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1/核转录因子E2相关因子2信号通路;;氧化应激
基金资助：贵州省科技计划项目(黔科合基础-ZK[2022]一般427);; 贵州省卫生健康委科学技术基金项目(gzwkj2021-244)
