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作者：章良忠;汪浩;赵艳民;严敏岳;
单位：金华职业技术学院医学院;浙江大学金华医院骨科;
摘要：目的 探究Runt相关转录因子(RUNX)3过表达对骨肉瘤细胞顺铂敏感性及磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响。方法 体外培养骨肉瘤细胞株MG-63细胞，将培养至对数生长期的MG-63细胞分为对照组(常规培养MG-63细胞)、顺铂组(添加10μmol/L的顺铂到MG-63细胞培养基中)、RUNX3阴性对照组(MG-63细胞转染RUNX3空质粒载体后，在培养基中加入10μmol/L的顺铂)、RUNX3过表达组(MG-63细胞转染RUNX3过表达质粒载体后，在培养基中加入10μmol/L的顺铂),继续培养48 h。荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测MG-63细胞中RUNX3 mRNA表达水平；细胞计数试剂盒-8、流式细胞仪、Transwell小室实验分别检测MG-63细胞活力、凋亡率和周期分布情况、侵袭能力；荧光定量PCR法、Western印迹法分别检测MG-63细胞PI3K、AKT mRNA和蛋白表达。结果 对照组、顺铂组、RUNX3阴性对照组MG-63细胞RUNX3 mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与对照组、顺铂组、RUNX3阴性对照组相比，RUNX3过表达组MG-63细胞中RUNX3 mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与对照组相比，顺铂组、RUNX3阴性对照组、RUNX3过表达组MG-63细胞活力、侵袭数目、S期、G2/M期比例、PI3K、AKT mRNA和蛋白表达水平显著降低，凋亡率、G0/G1期比例显著升高(P<0.05);顺铂组和RUNX3阴性对照组以上指标均无显著差异(P>0.05);与顺铂组、RUNX3阴性对照组相比，RUNX3过表达组MG-63细胞活力、侵袭数目、S期、G2/M期比例、PI3K、AKT mRNA和蛋白表达水平显著降低，凋亡率、G0/G1期比例显著升高(P<0.05)。结论 RUNX3过表达能增强骨肉瘤MG-63细胞的顺铂敏感性，其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。
关键词：Runt相关转录因子3;;骨肉瘤MG-63细胞;;顺铂敏感性;;磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B
基金资助：浙江省医药卫生科技计划项目(2022KY905)
