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作者：王美桀;刘兴旺;洪德坤;李放;白曼;
单位：沈阳农业大学动物科学与医学学院;
摘要：类无精症缺失基因（Deleted in Azoospermia Like Gene,DAZL）在雄性动物睾丸发育和精子发生过程中起着重要的调控作用。为探索DAZL在小尾寒羊睾丸发育和精子发生中的作用，本研究克隆了小尾寒羊DAZL基因CDS区全长序列，通过生物信息学软件分析其分子特征并构建系统发育进化树，同时采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及蛋白免疫印迹（Western-Blot）方法，检测DAZL基因和蛋白在小尾寒羊2月龄（性成熟前）、6月龄（性成熟）和12月龄（性成熟后）睾丸中的表达水平。结果表明：小尾寒羊DAZL基因的CDS区序列长度为888bp，共编码295个氨基酸，理论等电点（PI）为8.90，是不稳定的亲水性蛋白，二级结构和三级结构均以无规则卷曲构成，无β折叠，无信号肽，无跨膜结构域。小尾寒羊DAZL基因CDS区序列与山羊的同源性最高，达99%;DAZL基因和蛋白在小尾寒羊2月龄、6月龄和12月龄睾丸中均有表达，表达量随月龄增加呈下降趋势；2月龄、6月龄和12月龄差异极显著，而6月龄与12月龄的基因表达差异不显著，蛋白表达差异显著。综上，DAZL在小尾寒羊睾丸发育不同时期表达存在差异，说明其对睾丸发育和精子发生具有调控作用，但具体调控机制还有待于进一步研究。本研究结果将为深入研究DAZL在小尾寒羊睾丸发育和精子发生过程中的调控机制提供科学依据和理论参考。
关键词：小尾寒羊;;DAZL;;基因克隆;;生物信息学;;实时荧光定量PCR;;蛋白免疫印迹
基金资助：辽宁省教育厅基础研究项目（LSNQN202005）;; 辽宁省科技厅博士科研启动基金计划项目（2021-BS-137）
