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作者：刘萍;雷荃;徐隽;刘立;贺文娟;
单位：武汉市第四医院药学部;
摘要：目的 探讨LINC01278对肺癌PC9细胞奥希替尼耐药的影响及其作用机制。方法 利用双荧光素酶报告基因实验检测LINC01278和miR-491-5p的靶向关系。根据转染物不同，将PC9细胞分为对照组、pcDNA组(转染空载质粒pcDNA)、pcDNA-LINC01278组(转染LINC01278过表达质粒)、pcDNA-LINC01278+miR-NC组(共转染pcDNA-LINC01278和miR-491-5p阴性对照miR-NC)和pcDNA-LINC01278+miR-491-5p-inhibitor组(共转染pcDNA-LINC01278和miR-491-5p抑制剂miR-491-5p-inhibitor)。实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测LINC01278和miR-491-5p表达水平，CCK8法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，Transwell实验检测细胞侵袭能力，划痕愈合实验检测细胞迁移能力，Western印迹检测细胞中EGFR、p-EGFR蛋白表达。不同浓度的奥西替尼(0.001、0.010、0.100、1.000、10.000μmol/L)作用于各组细胞，CCK8法检测细胞增殖，评估奥西替尼药物敏感性。结果 双荧光素酶报告实验证明，LINC01278可靶向结合于miR-491-5p,过表达LINC01278可明显抑制PC9细胞中miR-491-5p表达(P<0.01)。过表达LINC01278可使PC9细胞增殖、侵袭和迁移能力显著升高，细胞凋亡率显著降低，细胞EGFR蛋白磷酸化水平显著升高，细胞对奥西替尼的药物敏感性显著降低(P<0.05);同时抑制miR-491-5p和过表达LINC01278可进一步明显加重后者对PC9细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移作用，进一步明显提高EGFR蛋白磷酸化水平，细胞对奥西替尼的药物敏感性进一步明显降低(P<0.05)。结论 LINC01278可通过靶向抑制miR-491-5p表达，促进EGFR磷酸化激活，进而诱导肺癌细胞PC9对奥希替尼的耐药性。
关键词：LINC01278;;miR-491-5p;;肺癌;;奥希替尼
基金资助：湖北省卫健委科研项目(WJ2023M134);; 武汉市卫健委青年项目(WX21Q14)
