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作者：史雪;于乐;谷洁冰;郑昭时;
单位：吉林省一汽总医院神经内科;吉林大学中日联谊医院神经内科;
摘要：目的 探讨长链非编码(Lnc)RNA磷酸酶和张力蛋白同源物诱导激酶(PINK)1-AS靶向调控miR-455-3p/Grb2协同结合蛋白(GAB)2轴对缺氧复氧(H/R)诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞(PC12)细胞损伤的作用及机制。方法 取生长状态良好的PC12细胞为研究对象，通过缺氧4 h复氧24 h建立PC12细胞损伤模型，并分为H/R组、H/R+PINK1-AS siRNA(PINK1-AS小干扰RNA)组、H/R+si NC(小干扰RNA阴性对照)组、H/R+PINK1-AS siRNA+inhibitor NC(模拟物阴性对照)组、H/R+PINK1-AS siRNA+miR-455-3p inhibitor(miR-455-3p抑制剂)组，并以未处理的PC12细胞为空白组。流式细胞仪及CCK-8分别检测细胞凋亡及增殖；实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中PINK1-AS、miR-455-3p、GAB 2 mRNA表达水平；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测氧化应激水平；Western印迹检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、核增殖抗原表达基因(Ki)-67及GAB2蛋白表达；双荧光素酶验证miR-455-3p分别与PINK1-AS、GAB2的靶向关系。结果 与空白组相比，H/R组凋亡率、丙二醛(MDA)水平、PINK1-AS、Bax、GAB2表达显著增加，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、增殖率、miR-455-3p、Ki-67表达、超氧化物歧化酶(SOD)水平显著降低(P<0.05);与H/R+si NC组相比，H/R+PINK1-AS siRNA组凋亡率、MDA水平、PINK1-AS、Bax、GAB2表达显著降低，SOD、GSH-Px水平、增殖率、miR-455-3p、Ki-67表达显著增加(P<0.05);与H/R+PINK1-AS siRNA+inhibitor NC组相比，H/R+PINK1-AS siRNA+miR-455-3p inhibitor组凋亡率、MDA水平、Bax、GAB2表达的显著增加，SOD、GSH-Px水平、增殖率、miR-455-3p、Ki-67表达显著降低(P<0.05)。miR-455-3p与PINK1-AS、GAB2存在靶向关系。结论 沉默PINK1-AS表达可通过miR-455-3p/Grb2协同结合蛋白GAB2轴减轻H/R诱导的PC12细胞损伤。
关键词：长非编码(Lnc)RNA磷酸酶和张力蛋白同源物诱导激酶(PINK)1-AS;;miR-455-3p/Grb2协同结合蛋白(GAB)2;;缺氧复氧;;肾上腺嗜铬细胞(PC12)
基金资助：吉林省科技发展计划项目(20180311075YY)
