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作者：许汉兵;韩建涛;张成鹏;周徽;
单位：武汉市第三医院(武汉大学同仁医院)普外科;
摘要：目的 探讨CircNRIP1调节微小RNA(miR)-340-5p/透明质酸合酶(HAS)2轴对结直肠癌细胞化疗敏感性的影响。方法 通过奥沙利铂(OXA)浓度递增建立HCT116-OXA,并随机分为空白组、siRNA阴性对照(si-NC)组、CircNRIP1特异性si-RNA(si-CircNRIP1)组、si-CircNRIP1+抑制剂阴性对照(si-CircNRIP1+inhibitor-NC)组、si-CircNRIP1+miR-340-5p抑制剂(si-CircNRIP1+miR-340-5p-inhibitor)组。实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测HCT116、HCT116-OXA中CircNRIP1、miR-340-5p、HAS2 mRNA表达；CCK-8法检测HCT116-OXA对OXA的耐药性；克隆形成实验检测细胞增殖；流式细胞仪检测细胞凋亡；Western印迹检测HAS2、增殖细胞相关抗原(Ki67)及B细胞淋巴瘤(Bcl)-2蛋白表达水平；双荧光素酶验证miR-340-5p与CircNRIP1、HAS2靶向关系。结果 双荧光素酶报告实验结果显示miR-340-5p与CircNRIP1、HAS2存在靶向关系。CircNRIP1、HAS2 mRNA在HCT116-OXA中明显上调，而miR-340-5p明显下调(P<0.05)。si-CircNRIP1组克隆形成数、IC50值、CircNRIP1、Ki67、Bcl-2、HAS2蛋白及mRNA表达较空白组、si-NC组显著降低，凋亡率、miR-340-5p表达显著增加(P<0.05);si-CircNRIP1+miR-340-5p-inhibitor组克隆形成数、半抑制浓度(IC50)值、Ki67、Bcl-2、HAS2蛋白及mRNA表达较si-CircNRIP1+inhibitor-NC组显著增加，凋亡率、miR-340-5p表达显著降低(P<0.05),CircNRIP1 mRNA表达无显著变化(P>0.05)。结论 干扰CircNRIP1可改善HCT116-OXA对OXA的耐药性，增强化疗敏感性，可能与调控miR-340-5p/HAS2有关。
关键词：CircNRIP1;;微小RNA(miR)-340-5p/透明质酸合酶(HAS)2;;结直肠癌细胞;;化疗敏感性
基金资助：武汉市医学科研项目立项任务书(WX19Q30)
