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作者:贾一轩;李佳骏;龚一鸣;狄冉;王翔宇;储明星;梁琛;
单位:山西农业大学动物科学学院;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,畜禽生物育种全国重点实验室;畜禽遗传资源发掘与精准育种山西省重点实验室;
摘要:BMP/SMAD通路与卵巢颗粒细胞增殖密切相关,本研究旨在通过筛选绵羊卵巢颗粒细胞添加BMP15前后的差异表达基因,为挖掘影响绵羊产羔数的关键基因提供理论支持。使用BMP15处理绵羊卵巢颗粒细胞,利用Western Blot检测SMAD1/5/9蛋白磷酸化程度的变化,再通过RNA-Seq筛选处理前后差异表达的基因,并通过RT-qPCR进行验证。使用BMP15处理绵羊卵巢颗粒细胞后,SMAD1/5/9蛋白磷酸化水平提高(P<0.05),RNA-Seq共筛选出231个差异表达基因,其中110个基因表达下调,121个基因表达上调。GO分析揭示了这些差异表达基因在细胞表面受体信号通路、胞外区以及蛋白质二聚化活性等方面显著富集。KEGG分析发现差异表达基因在与细胞增殖和分化密切相关的TGF-β、Notch、MAPK和Rap1信号通路富集(P<0.05)。此外,通过RT-qPCR验证了5个差异基因的表达水平,与RNA-Seq结果一致。本研究为揭示BMP/SMAD通路调控绵羊排卵数的分子机制提供了基础数据和科学基础。
关键词:绵羊;;BMP/SMAD通路;;卵巢颗粒细胞;;RNA-Seq;;差异表达基因
基金资助:国家自然科学基金项目(32272838和3186114301 2);; 财政部和农业农村部国家现代农业产业技术体系专项(CARS-38);; 中国农业科学院科技创新工程(ASTIP-IAS13);; 山西省基础研究计划面上项目(20210302123371);; 山西农业大学博士科研启动项目(2021BQ04)