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作者：唐璎;杨晓楠;马婷婷;黄佳;邓展瑞;
单位：甘肃省产品质量监督检验研究院;
摘要：文章为实现生乳中嗜冷假单胞菌现场即时可视化检验，以4种嗜冷假单胞菌（荧光假单胞菌、莓实假单胞菌、恶臭假单胞菌、隆德假单胞菌）为研究对象，设计密封便携快速提取DNA装置，内置膜富集与磁珠富集核酸提取功能，从而取代传统检验及PCR快检技术中的增菌培养过程，缩短检验时间。并基于4种嗜冷假单胞菌gyr B、car A基因设计可视化环介导等温扩增体系。结果表明，使用密封便携快速提取DNA装置和可视化环介导等温扩增体系检测生乳中的嗜冷假单胞菌，可将现行标准的检验时间由7～12 d缩短至2 h内，方法特异性好，检出限为10 CFU/mL,Ct值变异系数<5%，重复性好，实现可视化观测检验结果。研究建立的密封便携快速提取DNA装置和可视化环介导等温扩增体系实现现场即时可视化快速检测生乳中嗜冷假单胞菌，打破核酸检验实验室、设备和人员能力的限制，为嗜冷假单胞菌在基层快速检验提供技术支撑。
关键词：生乳;;嗜冷假单胞菌;;提取DNA装置;;磁珠纯化DNA;;可视化扩增体系
基金资助：甘肃省自然科学基金项目（23JRRA1707）
