来源：期刊VIP网 时间：
作者：王莹宇;张永根;陈文柏;
单位：徐州医科大学附属医院检验科;徐州医科大学附属医院核医学科实验室;
摘要：目的：对一例遗传性凝血因子Ⅶ（FⅦ）缺陷症的患者及其家系进行基因分析，探讨其分子发病机制。方法：使用Sysmex-CS5100全自动血凝分析仪检测先证者及其家系成员（共3代8人）的凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、D-二聚体、纤维蛋白降解产物以及血浆FⅦ的活性（FⅦ:C）水平；PCR法扩增先证者凝血因子Ⅶ基因（F7）所有外显子和侧翼序列，PCR产物纯化后测序，发现突变位点则反向测序给予证实；使用Clustal W软件对突变位点进行保守性分析；应用Mutation Taster和Poly Phen-2在线生物学软件评估突变氨基酸对FⅦ蛋白结构与功能的危害性；运用Swiss软件对突变建模分析。结果：凝血常规检查结果显示，先证者PT单独性延长至42.5 s;FⅦ:C明显降低，仅为2%；同样先证者外婆、母亲和妹妹的FⅦ:C都有轻度降低，分别为49%、51%和42%；父亲各指标均在正常参考范围。基因分析结果显示，先证者F7基因第6号外显子c DNA的646位发生G>A杂合突变，导致FⅦ催化区的156位甘氨酸被替换为丝氨酸（p.Gly156Ser）。F7其他外显子和侧翼序列的测序结果均正常。其外婆、母亲和妹妹均携带c.646G>A杂合突变，父亲为正常野生型。模型构建显示p.Gly156Ser突变使该位点氨基酸极性发生改变并出现侧链，从而使蛋白的不稳定性增加，可能影响所在结构域的催化活性。同时，Mutation Taster和Poly Phen-2两个在线生物信息学软件也高分预测该突变具有致病性。结论：该遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症患者FⅦ蛋白p.Gly156Ser错义突变与血浆FⅦ:C水平降低有关。
关键词：遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症;;PCR;;基因突变;;模型分析
