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作者：吕艳杭;姚木铭;杨达龙;吴燕梅;张扬帆;李云南;张荣玲;黄腾蛟;王宜宸;
单位：厦门大学附属龙岩中医院;北京中医药大学附属厦门市中医院;厦门大学研究生学院;
摘要：目的 探讨越婢汤加味含药血清对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人肾小管上皮细胞HK-2间质转化的影响及分子机制研究。方法 制备越婢汤加味含药血清，将HK-2细胞作为研究对象，常规培养后将细胞分组并予以刺激处理：对照组、模型组、依那普利组、越婢汤加味组、越婢汤加味+p38MAPK抑制剂组。噻唑蓝(MTT)法检测越婢汤加味含药血清对HK-2细胞活力的影响；Western印迹检测含药血清对HK-2细胞α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、E-钙黏蛋白(cadherin)、p-p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、核因子E2相关因子(Nrf)2蛋白表达量；逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测含药血清对HK-2细胞α-SMA、E-cadherin、p-p38MAPK、Nrf2 mRNA表达量的影响；比色法检测含药血清对细胞活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量变化。结果 与对照组相比，模型组细胞增殖率、E-cadherin、Nrf2蛋白及mRNA和SOD水平显著下调，α-SMA、p38MAPK蛋白及mRNA和ROS、MDA水平显著上调(P<0.001)。与模型组相比，越婢汤加味组细胞增殖率、Nrf2 mRNA、E-cadherin mRNA及蛋白和SOD水平显著上调，α-SMA mRNA、MDA、ROS水平显著下调(P<0.05,P<0.01,P<0.001);越婢汤+p38MAPK抑制剂组细胞增殖率、E-cadherin、Nrf2 mRNA及蛋白和SOD水平显著上调，α-SMA mRNA及蛋白和MDA、ROS水平显著下调(P<0.01,P<0.001)。结论 越婢汤加味能逆转H_2O_2诱导的肾小管上皮细胞HK-2上皮间质转化，其机制可能与其抑制p38MAPK/Nrf2/ROS信号通路活化有关。
关键词：越婢汤加味;;氧化应激;;上皮间充质转化;;细胞;;信号通路
基金资助：福建省医学创新课题科技厅项目(2021CXA047);; 龙岩市面上项目(2021LYF7062);; 福建中医药大学校管课题(XB2022159)
