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作者：姜海燕;王颜;王瑞华;舒刚;
单位：六盘水市人民医院胸心血管外科;
摘要：目的 探讨汉黄芩素调节Hippo-Yes相关蛋白(YAP)信号通路对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞自噬和凋亡的影响。方法 H9C2细胞经不同浓度(1.00、1.88、3.75、7.50、15.00、30.00 mol/L)Wog处理后，进行H/R处理，检测Wog对H9C2细胞存活率的影响，确定最佳浓度；将H9C2细胞分为对照组(Control组)、H/R组、Wog低浓度组(Wog-L组)、Wog中浓度组(Wog-M组)、Wog高浓度组(Wog-H组)和Wog+YAP抑制剂(Verteporfin)组(Wog+VP组)、Wog+自噬抑制剂组(Wog+3-MA组),经H/R诱导后，检测细胞凋亡率、乳酸脱氢酶(LDH)水平、免疫荧光检测自噬体数量、Western印迹分析凋亡蛋白[B细胞淋巴瘤(Bcl)2、Bcl2相关X蛋白(Bax)、Cleaved胱天蛋白酶(caspase)-3]、自噬蛋白[(微管相关蛋白1A/1B轻链(LC)3Ⅱ、LC3Ⅰ、苄氯素(Beclin)1、p62]及信号通路蛋白[p-大肿瘤抑制激酶(LATS)1、LATS1、p-YAP、YAP]表达。结果 与H/R组比较，不同浓度(1.00、1.88、3.75、7.50、15.00、30.00μmol/L)Wog可增加细胞存活率，选用7.50、15.00、30.00 mol/L的Wog进行后续实验；与H/R组比较，Wog-L、Wog-M、Wog-H组LDH、细胞凋亡率、Cleaved caspase-3、p62显著下降，Bcl-2/Bax、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、自噬体数量、p-LATS1/LATS1、p-YAP/YAP显著增加，且呈浓度依赖性(P<0.05);与Wog-H组比较，Wog+VP组和Wog+3-MA组LDH、细胞凋亡率、Cleaved caspase-3、p62显著增加，Bcl-2/Bax、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、自噬体数量显著下降(P<0.05),Wog+VP组p-LATS1/LATS1、p-YAP/YAP显著降低(P<0.05)。结论 Wog通过激活Hippo-YAP信号通路诱导H9C2细胞自噬，抑制细胞凋亡。
关键词：汉黄芩素;;Hippo-Yes相关蛋白(YAP)信号通路;;缺氧/复氧;;心肌细胞自噬;;心肌细胞凋亡
基金资助：2022年贵州省卫生健康委科学技术基金项目(gzwkj2022-353)
