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作者：符亮;钟静;邓小康;雷明华;周立君;李文刚;
单位：三亚市人民医院消化内科;
摘要：目的 探究外源性金属硫蛋白(MT)联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)对急性肝衰竭(ALF)模型大鼠肝功能及肝组织再生的影响。方法 从SD大鼠分离培养BMSCs，经成骨与成脂诱导分化培养基诱导后，进行茜素红和油红O染色检测细胞成骨成脂分化能力，流式细胞术测定干细胞表面标志物表达情况。动物实验分为对照(Control)组、模型(Model)组、MT组、BMSCs组、MT+BMSCs组各10只。除Control组外，其余4组采用D-氨基半乳糖(Gal)联合脂多糖(LPS)处理构建ALF模型，MT组和MT+BMSCs组腹腔注射MT溶液，BMSCs组和MT+BMSCs组尾静脉注射BMSCs; 48 h后，全自动生化分析仪检测各组血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及总胆红素(TBil)含量，酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清中炎症因子白细胞介素(IL)-6与肿瘤坏死因子(TNF)-α含量，苏木素-伊红(HE)染色观察各组肝组织病理变化，免疫组化染色检测各组肝组织内增殖细胞核抗原(PCNA)表达; 12 w后，Masson染色观察各组肝组织纤维化程度。结果 分离的细胞生长状况良好，呈长梭形，茜素红染色后细胞内有片状红色团块的钙结节，油红O染色后细胞内有多个红色脂滴，表面CD29、CD44、CD90明显高表达，CD34、CD45明显低表达，说明分离的细胞为BMSCs。相较于Model组，MT组和BMSCs组肝组织内细胞坏死、变性减轻，表现为少量炎性细胞浸润，肝组织内蓝色胶原纤维沉积减少，纤维化得到改善，血清AST、ALT活性及TBil含量降低，IL-6、TNF-α含量减少，组织内PCNA阳性率上调，差异均具有统计学意义(均P<0.05);而相较于MT组和BMSCs组，MT+BMSCs组肝组织未见明显损伤，且组织内蓝色胶原纤维沉积更少，未见明显纤维化，血清AST、ALT活性及TBil含量进一步降低，IL-6、TNF-α含量减少，PCNA阳性率进一步上调，差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论 MT联合BMSCs能够显著改善ALF大鼠肝功能，促进肝组织再生，效果优于MT或BMSCs单独作用。
关键词：急性肝衰竭;;金属硫蛋白;;骨髓间充质干细胞;;肝功能;;肝组织再生
基金资助：海南省卫生健康行业科研项目(21A200224)
