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作者:宿瑞琼;潘晓玥;陈秋元;李云鸿;王银;
单位:宁夏颅脑疾病重点实验室;宁夏医科大学基础医学院;宁夏医科大学附属中医医院;
摘要:目的 探讨氧化苦参碱(OMT)对神经胶质瘤U87细胞的抗肿瘤作用及机制。方法 培养神经胶质瘤U87细胞系,加入不同浓度OMT(0、5、10、25、50和100μg/ml)处理细胞24 h,利用CCK-8法检测各组细胞的存活率,Transwell实验观察细胞迁移,Western印迹检测热休克蛋白(HSP) 60表达,同时检测凋亡通路蛋白Toll样受体(TLR) 4和半胱天冬蛋白酶(Caspase)-3表达,免疫荧光染色技术观察细胞形态和数目,同时检测HSP60和核因子(NF)-κB表达。结果 与Control组相比,10μg/ml OMT作用24 h显著降低了U87细胞活力(P<0.05)。细胞迁移实验显示,OMT显著抑制U87细胞迁移(P<0.05)。Western印迹结果显示,OMT作用后HSP60和Caspase-3表达显著增加,TLR-4表达明显下降(P<0.05)。与Control组比较,10μg/ml OMT作用24 h显著抑制抗凋亡因子Bcl-2蛋白表达,显著促进促凋亡因子Bax蛋白表达(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示,OMT作用后HSP60表达显著增加,NF-κB表达明显下降(P<0.05)。10μg/ml OMT组U87细胞数目较Control组显著减少(P<0.05),突触变短。结论 OMT对神经胶质瘤U87细胞具有明显的抗肿瘤作用,促进U87细胞凋亡,对细胞的生长及突触形成具有抑制作用。HSP60及TLR-4/NF-κB信号通路均参与了OMT的抗肿瘤作用,但可能分别有不同的机制。
关键词:氧化苦参碱;;神经胶质瘤U87细胞;;热休克蛋白(HSP)60;;细胞凋亡;;Toll样受体(TLR)-4-核因子(NF)-κB信号通路
基金资助:宁夏自然科学基金项目(2023AAC02037,2023AAC03162)