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中国乳品工业2024年第05期:动物双歧杆菌乳亚种i797菌株特异性量化分析方法研究

来源:期刊VIP网 时间:


作者:赵磊;张栋;刘洋;

单位:上海市质量监督检验技术研究院国家市场监管重点实验室(乳及乳制品检测与监控技术);君乐宝乳业集团股份有限公司;

摘要:动物双歧杆菌乳亚种i797(Bifidobacterium animalis subsp. lactis i797)是一株具有改善小儿腹泻和消化不良功能的潜在益生菌。通过与其它22株动物双歧杆菌乳亚种菌株进行全基因组测序-单核苷酸多态性(Whole Genome Sequencing-Single Nucleotide Polymorphism, WGS-SNP)分析,确定了i797菌株位于K1717_01615基因上的一个特异性位点。根据该位点设计引物及探针,基于荧光定量PCR建立了i797菌株的量化分析方法。结果表明,所选位点可以有效区分i797与其它18株双歧杆菌,且在传代40次过程中表现出较强的稳定性。该检测方法对于i797菌株DNA浓度和菌液浓度的灵敏度分别为1.5 pg和104CFU/mL,重复性和重现性检测结果的相对标准偏差分别小于2%和6%,并且对于高浓度同亚种菌株ATCC 27673的抗干扰能力较强。利用该方法可以实现复合益生菌产品中i797菌株的准确量化分析,为益生菌产品的质量控制和合规性评估提供了有效的解决方案。

关键词:动物双歧杆菌乳亚种;;全基因组测序-单核苷酸多态性;;株水平检测;;定量PCR

基金资助:国家市场监督管理总局技术保障专项项目(2023YJ16)