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作者：王晓超;包晶晶;陈殿斌;
单位：呼和浩特市第一医院口腔科;
摘要：目的 探讨槲皮素调控p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路对大鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)向成牙本质细胞样细胞分化的促进作用。方法 分离培养大鼠BM-MSCs并鉴定；将鉴定好的大鼠BM-MSCs分别培养于含25μmol/L的槲皮素、含10μmol/L p38 MAPK通路抑制剂SB203580、含25μmol/L的槲皮素和10μmol/L SB203580、含6μg/L转化生长因子(TGF)-β1的牙胚细胞条件培养基中，记为槲皮素组、p38 MAPK抑制剂组、槲皮素+p38 MAPK抑制剂组和阳性对照组，另取BM-MSCs细胞培养于牙胚细胞条件培养基内记为空白对照组。培养7 d后，细胞计数试剂盒(CCK)8法检测细胞增殖能力；茜素红染色检测细胞矿化结节形成情况；逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组p38 MAPK、Runt相关转录因子(Runx)2、碱性磷酸酶(ALP)、牙本质涎磷蛋白(DSPP) mRNA表达；Western印迹法检测各组p38 MAPK、Runx2、ALP、DSPP、p-p38 MAPK蛋白表达。结果 分离得到的BM-MSCs细胞排列整齐密集，大小均一，多为长梭形，呈旋涡状生长，细胞表型CD44、CD90表达率分别是97.12%、99.8%,细胞表型CD34、CD45表达率分别是0.47%、0.12%。与空白对照组相比，阳性对照组和槲皮素组细胞增殖能力和矿化结节数量明显升高(P<0.05),p38 MAPK抑制剂组细胞增殖能力和矿化结节数量明显降低(P<0.05);与槲皮素组相比，槲皮素+p38 MAPK抑制剂组细胞增殖能力和矿化结节数量明显降低(P<0.05)。与空白对照组相比，阳性对照组和槲皮素组p38 MAPK蛋白表达明显降低，Runx2、ALP、DSPP mRNA和蛋白表达及p-p38 MAPK蛋白表达明显升高(P<0.05),p38 MAPK抑制剂组p38 MAPK蛋白表达明显升高，Runx2、ALP、DSPP mRNA和蛋白表达及p-p38 MAPK蛋白表达明显降低(P<0.05);与槲皮素组相比，槲皮素+p38 MAPK抑制剂组p38 MAPK蛋白表达明显升高，Runx2、ALP、DSPP mRNA和蛋白表达及p-p38 MAPK蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论 槲皮素有促进大鼠BM-MSCs向成牙本质细胞样细胞分化的作用，推测是通过激活p38 MAPK信号通路促进Runx2、ALP、DSPP表达，提高BM-MSCs增殖和成骨分化能力实现的。
关键词：槲皮素;;p38丝裂原活化蛋白激酶;;骨髓间充质干细胞;;成牙本质细胞
