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作者：吴言悟;纪腾飞;许安娜;王燊妮;李秀珍;金光军;
单位：晋江市中医院麻醉科;浙江中医药大学附属第二医院急诊医学科;
摘要：目的 探究微小RNA(miR)-124-3p对脓毒症心肌损伤的影响及其分子作用机制。方法 将C57BL/6小鼠随机分为对照组和模型组，模型组使用10 mg/kg脂多糖(LPS)构建小鼠脓毒症心肌损伤模型；对照组腹腔注射等量生理盐水。苏木素-伊红(HE)染色后光镜下观察心肌组织损伤；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血中心肌损伤标志物和炎症相关因子表达水平。使用0.5μg/ml LPS刺激心肌细胞构建体外细胞模型设为LPS组，对照组使用等量磷酸盐缓冲液(PBS)设为PBS组。使用Lipofectamine2000转染试剂将miR-124-3p mimic及其对照物转染到细胞内，设为LPS+miRNA-124-3p mimic组和LPS+mimic NC组。CCK-8法检测细胞活性。流式细胞仪检测细胞凋亡水平。定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测组织和细胞中miR-124-3p表达；Western印迹检测组织和细胞中p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)-Nod样受体蛋白(NLRP)3相关蛋白表达。结果 模型组心肌组织损伤程度较对照组更为严重，且外周血中心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶(CKMB)、心肌肌钙蛋白(CTN)T和炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平显著高于对照组，miR-124-3p表达显著低于对照组，模型组p38 MAPK-NLRP3炎性小体信号通路相关蛋白p-p38、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、剪切的胱天蛋白酶(cleaved-caspase)1表达均显著上升(P<0.05)。LPS组心肌细胞活性、miR-124-3p表达显著低于PBS组，细胞凋亡水平显著高于PBS组，且p38 MAPK-NLRP3炎性小体信号通路异常激活；使用qRT-PCR检测转染效率的结果显示，与LPS+minmicNC组比较，miR-124-3p mimic组显著增强了心肌细胞中miR-124-3p表达、细胞活性显著增强(P<0.05),细胞凋亡明显被抑制；诱导的心肌细胞中miRNA-124-3p对p38 MAPK-NLRP3炎性小体通路有抑制作用，相较于LPS+mimic NC组，LPS+miR-124-3pmimic组p-p38、NLRP3、ASC、cleaved-caspase的表达均明显下调(P<0.05)。结论 miR-124-3p在脓毒症小鼠心肌组织和LPS刺激下体外心肌细胞中显著低表达。miR-124-3p通过调控p38 MAPK-NLRP3炎性小体信号通路，改善脓毒症心肌损伤。
关键词：脓毒症;;心肌损伤;;微小RNA(miR)-124-3p;;p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK);;Nod样受体蛋白(NLRP)3炎性小体
基金资助：泉州市科技计划项目(2022NS016)
