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作者：汤杰;李佩霖;张晓宇;李晓彤;虞富豪;田家仪;许润香;尹博丰;丁丽;朱恒;
单位：军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所;河北大学生命科学学院;空军军医大学空军特色医学中心血液科;空军军医大学研究生院;河北北方学院研究生院;安徽医科大学基础医学院;
摘要：目的：制备一种高表达造血支持因子的临床级别人脐带间充质干细胞（hUC-MSC）并对其干细胞特性进行评价。方法：采集健康产妇足月剖宫产的胎儿脐带组织，机械剥离华通氏胶；采用组织块贴壁培养法和酶消化培养法，联合含有人血小板裂解物的无动物血清培养体系获得hUC-MSC。通过流式细胞术检测两种方法获取的hUC-MSC的表型特征；通过CCK-8和成纤维细胞集落形成实验（CFU-F）检测两组细胞的增殖能力差异；通过成脂、成骨、成软骨的诱导分化，检测两组hUC-MSC多向分化潜能的差异；通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测两组hUC-MSC造血支持因子SCF、IL-3、CXCL12、VCAM1和ANGPT1的mRNA表达差异。结果：流式细胞术检测结果表明，两种方法获得的hUC-MSC均高表达CD73、CD90、CD105，低表达CD31、CD45、HLA-DR;CCK-8和CFU-F检测结果表明，组织块贴壁培养法获得的hUC-MSC的增殖能力更强；三系分化实验表明，两组hUC-MSC的多向分化潜能未有明显差异；RT-qPCR检测结果表明，组织块贴壁培养法获得的hUC-MSC造血支持因子SCF、IL-3、CXCL12、VCAM1、ANGPT1的mRNA表达水平更高。结论：在无动物血清培养体系下，成功制备了高表达造血支持因子的临床级别hUC-MSC。
关键词：脐带间充质干细胞;;华通氏胶;;无动物血清培养体系;;造血支持能力
基金资助：北京自然科学基金（7222123,L212065,7192203）;; 国家干细胞重点研发专项（2022YFA1103500,2022YFA1104100）;; 国家自然科学基金（82172388,82372373,81871771,81500083,81572159）
