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作者:汪莹;朱建光;郝欢;陈大平;
单位:咸宁市中心医院(湖北科技学院附属第一医院)检验科;咸宁市中心医院(湖北科技学院附属第一医院)甲乳外科;
摘要:目的 探讨长链非编码RNA-同源盒D基因簇反义生长相关长非编码RNA(LncRNA-HAGLR)调节微小RNA(miR)-576-5p/碱性螺旋-螺旋转录因子(TWIST)1轴对乳腺癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法 用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞和组织中HAGLR、miR-576-5p和TWIST1 mRNA表达水平;然后将SKBR-3细胞分为control组、sh-NC组、sh-HAGLR组、sh-HAGLR+inhibitor NC组、sh-HAGLR+miR-576-5p inhibitor组、sh-HAGLR+oe-NC组,sh-HAGLR+oe-TWIST1组;用qRT-PCR检测各组细胞HAGLR、miR-576-5p和TWIST1 mRNA表达水平;检测细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭;Western印迹检测细胞中TWIST1、Ki67、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。验证miR-576-5p与HAGLR和TWIST1的靶向关系。结果 与癌旁组织比较,乳腺癌组织和细胞中HAGLR和TWIST1 mRNA表达显著升高,miR-576-5p表达显著降低(P<0.05)。与Control组和sh-NC组比较,sh-HAGLR组SKBR-3细胞中HAGLR和TWIST1 mRNA表达、450 nm处吸光度(OD450)值、细胞增殖率、迁移数和侵袭数及Ki67、TWIST1、Bcl-2蛋白表达明显下降,miR-576-5p表达、凋亡率及Bax蛋白表达明显增高(P<0.05);与sh-HAGLR+inhibitor NC组比较,sh-HAGLR+miR-576-5p inhibitor组miR-576-5p表达、凋亡率及Bax蛋白表达明显下降,TWIST1 mRNA表达、OD450值、细胞增殖率、迁移数和侵袭数及Ki67、TWIST1、Bcl-2蛋白表达明显增高(P<0.05);与sh-HAGLR+oe-NC组相比,sh-HAGLR+oe-TWIST1组SKBR-3细胞TWIST1 mRNA表达、OD450值、细胞增殖率、迁移数和侵袭数及Ki67、TWIST1、Bcl-2蛋白表达明显升高,凋亡率及Bax蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论 干扰HAGLR可能通过miR-576-5p/TWIST1轴抑制乳腺癌细胞恶性表型。
关键词:长链非编码RNA-同源盒D基因簇反义生长相关长非编码RNA(LncRNA-HAGLR);;微小RNA(miR)-576-5p;;碱性螺旋-螺旋转录因子(TWIST)1;;乳腺癌
基金资助:湖北省自然科学基金一般面上项目(2023AFB975)