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作者:曹青;何霞飞;韩行;廖顺新;杨陆涛;
单位:九江市第一人民医院烧伤整形与创面修复科;
摘要:目的 探讨肠三叶因子(ITF)对严重烧伤小鼠模型肠黏膜NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白(NLRP)3炎症小体活化及肠屏障功能影响。方法 将60只C57BL/6小鼠随机分为假烧伤组、烧伤组、低、中、高剂量ITF干预组及NLRP3激动剂组,每组10只,除假烧伤组外均建立严重烧伤小鼠模型,假烧伤组、烧伤组给予生理盐水腹腔注射,各ITF干预组用重组ITF 0.5、1.0、2.0 ml/kg腹腔注射,NLRP3激动剂组用高剂量ITF和尼日利亚菌素(4 mg/kg)共同干预。干预14 d,酶联免疫吸附试验检测血清二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸浓度、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,Western印迹实验检测肠组织闭锁小带蛋白(ZO)-1、闭合蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白(Claudin)-1、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶(Caspase)-1蛋白表达水平,实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA相对表达量。结果 与假烧伤组比较,烧伤组、低剂量ITF干预组血清DAO、D-乳酸、TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA水平、NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0.05),肠组织ZO-1、Occludin、Claudin-1蛋白表达、SOD水平显著降低(P<0.05);与烧伤组比较,中、高剂量ITF干预组血清DAO、TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA水平、NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白及mRNA表达水平显著降低(P<0.05),肠组织ZO-1、Occludin、Claudin-1蛋白表达水平、SOD水平显著升高(P<0.05),NLRP3激动剂组血清DAO、NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0.05)。结论 ITF可显著改善烧伤引起的肠屏障损伤、炎症因子升高和氧化应激,可能与抑制NLRP3炎性小体活化相关。
关键词:肠三叶因子;;严重烧伤;;肠黏膜;;NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3炎症小体;;肠屏障