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作者：张兵;徐罡;胡文健;洪小珍;许先国;
单位：浙江省血液中心输血医学研究所;义乌市中心血站;
摘要：目的:建立基于实时荧光定量PCR(qPCR)技术的Diego、MNS、Kell血型基因分型方法，并初步应用于献血者稀有血型筛查。方法:利用血型血清学方法和基于测序分型的PCR-SBT法，制备包含各等位基因杂合子和纯合子的血型基因标准品。设计血型基因特异性扩增引物和杂交探针，摸索建立qPCR检测Diego、MNS、Kell血型基因型的方法。利用建立的qPCR法对186例献血者进行血型鉴定。结果:建立了基于qPCR技术鉴定Dia/Dib、S/s、K/k血型抗原的方法，基因标准品检测分型结果与血清型及PCR-SBT检测的基因型完全一致。采用qPCR法检测186份献血者样本，发现11例DI*A/B杂合型，19例GYPB*S/s杂合型，其余均为DI*B/B、GYPB*s/s、KEL*02/02纯合型，未发现DI*A/A、GYPB*S/S、KEL*01.01/01.01稀有血型。结论:建立的qPCR方法适用于Diego、MNS、Kell血型基因分型，可用于献血者批量筛查和稀有血型建库。
关键词：实时荧光定量PCR;;Diego血型;;MNS血型;;Kell血型;;基因分型
基金资助：浙江省血液安全研究重点实验室开放课题(2021KF003)
