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作者：刘英杰;王晨;程涛;程辉;
单位：天津医科大学,细胞生态海河实验室;北京协和医学院/中国医学科学院/血液学研究所/血液病医院,血液与健康全国重点实验室,国家血液系统疾病临床医学研究中心,细胞生态海河实验室;
摘要：目的:探讨胎盘组织及其间充质干细胞来源的细胞外囊泡(EV)对成体造血干/祖细胞(HSPC)的支持作用，以优化HSPC培养体系。方法:从小鼠胎盘组织及胎盘间充质干细胞(MSC)中提取细胞外囊泡(分别命名为PL-EV和PL-MSC-EV),并设置浓度梯度(0、1、10、50、100和200μg/ml)与3 000颗成体骨髓LKS~+细胞(lineage~- c-Kit~+ Sca-1~+)共培养72 h。通过流式细胞术检测共培养后LKS~+细胞的比例，并利用集落形成实验评估其自我更新及多向分化潜能。结果:与空白对照组相比，共培养72 h后，10μg/ml及以上的PL-EV浓度组中LKS~+细胞比例显著增高，其中10μg/ml组的LKS~+细胞绝对数量最多(899±171颗),且LT-HSC(LKS~+ CD135~-CD34~-)的比例最高(0.67%±0.07%)。在PL-MSC-EV共培养体系中，1μg/ml组的LKS~+细胞绝对数达到峰值(1011±99颗),但LT-HSC的比例较低(0.15%±0.05%)。对比两种培养体系，10μg/ml PL-EV和1μg/ml PL-MSC-EV对LKS~+细胞的增殖效果最为显著，且两者间无显著差异。集落形成实验显示，PL-EV培养体系中，1、10μg/ml浓度组LKS~+集落形成数量较空白对照组无显著统计学差异；而在PL-MSC-EV培养体系中，1μg/ml组的LKS~+集落形成能力最强，当EV浓度高于10μg/ml时，集落形成能力均显著下降。结论:PL-EV和PL-MSC-EV能够有效维持HSPC的生长和功能，其中PL-MSC-EV在保留LKS~+细胞干性方面表现更佳，展现了其在优化HSPC培养体系中的潜力。
关键词：胎盘;;间充质干细胞;;细胞外囊泡;;造血干/祖细胞;;体外培养
基金资助：中国科学技术部项目(2021YFA1100900);; 国家自然科学基金(92468206,92368202,82400145);; 中国医学科学院(CAMS)医学科学创新基金(2021-I2M-1-040,2021-I2M-1-019)、CAMS中央研究院基础研究基金(3332021093);; 海河细胞生态系统创新基金(24HHXBSS00006);; 盈康一生血液与健康科创菁英领航计划(HH25KYHX0018)
