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作者：汪思云;朱琦;谭春霞;鲁放;卢涛;
单位：北京中医药大学生命科学学院;
摘要：目的:探究羟基红花黄色素A(HSYA)对人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)复制性衰老的作用及机制。方法:通过连续体外扩增构建hUC-MSC复制性衰老模型，以P2代细胞为对照组，P10代细胞为衰老组。将衰老的细胞置于含有HSYA的培养基中培养，利用CCK-8和Incucyte S3动态活细胞成像分析系统分别检测细胞活力和细胞融合度，选取适宜浓度和时间进行后续实验。选取0.01 mg/ml的HSYA预处理衰老的细胞，衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色评估细胞衰老状况，qPCR法检测端粒相对长度，荧光探针DCFH-DA染色检测细胞内活性氧水平，JC-1染色法检测线粒体膜电位的变化，实时荧光定量qPCR法检测p53、p16、p21、OCT4和SOX2基因的表达，Western blot检测p53、p16、OCT4和SOX2蛋白的表达。结果:HSYA可以显著降低衰老细胞的SA-β-gal染色阳性率，抑制端粒的损耗，减少衰老细胞中活性氧的积累，提高线粒体膜电位，下调p53和p16基因的表达，上调OCT4基因的表达。HSYA也显著降低了p16蛋白的表达水平，提高了OCT4和SOX2蛋白的表达水平。结论:HSYA可能通过调控p53和p16信号通路，抑制氧化应激反应，改善hUC-MSC的复制性衰老。
关键词：羟基红花黄色素A;;人脐带间充质干细胞;;衰老;;氧化应激
基金资助：国家自然科学基金面上项目(52173276)
