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作者：侯海涛;褚丽莎;杨帆;胡安祥;
单位：滕州市中心人民医院乳腺甲状腺外科;滕州市中心人民医院肿瘤二科;
摘要：目的 探讨Linc00839调节miR-142-5p/卷曲蛋白(FZD)7轴对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响。方法 以实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测人正常乳腺上皮细胞MCF-10A及人乳腺癌MCF-7、MDA-MB231、Bcap-37细胞Linc00839、miR-142-5p及FZD7表达。体外培养MCF-7细胞并随机分为对照组、Linc00839 siRNA(转染Linc00839 siRNA)组、miR-142-5p mimics(转染miR-142-5p mimics)组、阴性对照(共转染NC-Linc00839 siRNA与NC-miR-142-5p)组、Linc00839 siRNA+miR-142-5p inhibitor(共转染miR-142-5p inhibitor与Linc00839 siRNA)组，分组进行转染后以RT-PCR实验检测各组细胞Linc00839、miR-142-5p及FZD7表达；以噻唑蓝(MTT)法、TUNEL染色、细胞划痕实验、Transwell实验检测各组细胞恶性生物学行为(增殖、凋亡、迁移与侵袭)。将转染后的各组MCF-7细胞接种在裸鼠右腋皮下以构建其移植瘤模型，检测21 d后移植瘤体积并以TUNEL染色检测各组裸鼠移植瘤组织细胞凋亡；Western印迹实验检测各组MCF-7细胞与其裸鼠移植瘤组织凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2]与FZD7蛋白表达。以双荧光素酶报告实验验证Linc00839对MCF-7细胞miR-142-5p、miR-142-5p对MCF-7细胞FZD7的靶向调控作用。结果 与MCF-10A细胞相比，MCF-7、MDA-MB231、Bcap-37细胞Linc00839、FZD7 mRNA明显升高，miR-142-5p表达明显降低(P<0.05)。与对照组相比，Linc00839 siRNA组、miR-142-5p mimics组细胞FZD7 mRNA表达、细胞活性、迁移率、侵袭数、FZD7及Bcl-2蛋白表达、移植瘤体积明显降低，细胞miR-142-5p表达、细胞凋亡率、移植瘤组织细胞凋亡率和Bax蛋白表达显著升高(P<0.05)。与Linc00839 siRNA组相比，Linc00839 siRNA+miR-142-5p inhibitor组细胞FZD7 mRNA表达、细胞活性、迁移率、侵袭数、FZD7及Bcl-2蛋白表达、移植瘤体积明显升高，细胞miR-142-5p表达、细胞凋亡率、移植瘤组织细胞凋亡率和Bax蛋白表达明显降低(P<0.05)。Linc00839可靶向下调MCF-7细胞miR-142-5p表达，且miR-142-5p可靶向下调MCF-7细胞FZD7表达。结论 敲低Linc00839可通过上调miR-142-5p而降低FZD7表达，从而导致乳腺癌细胞增殖、裸鼠体内生长、迁移与侵袭的抑制，并使其凋亡增强，最终抑制其恶性生物学行为。
关键词：Linc00839;;miR-142-5p/卷曲蛋白(FZD)7;;乳腺癌细胞;;恶性生物学
基金资助：山东省医药卫生科技发展计划项目(2016WS0627)
