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作者:杜新茹;王静;刘亚飞;郑素粉;
单位:开封市中心医院检验科;开封市中心医院眼科;
摘要:目的 探究长链非编码RNA(LncRNA)Opa相互作用蛋白5反义转录物(OIP5-AS)1靶向微小RNA(miR)-150-5p调节过氧化氢(H_2O_2)诱导的人晶状体上皮细胞HLE-B3增殖、凋亡和迁移的作用机制。方法 实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)分析H_2O_2诱导与不诱导的HLE-B3细胞中LncRNA OIP5-AS1和miR-150-5p表达水平。双荧光素酶报告基因实验检测LncRNA OIP5-AS1与miR-150-5p的靶向关系。将转染后的HLE-B3细胞H_2O_2诱导依次分为H_2O_2组、H_2O_2+si-NC组、H_2O_2+si-OIP5-AS1组、H_2O_2+si-OIP5-AS1+anti-NC组、H_2O_2+si-OIP5-AS1+anti-miR-150-5p组。噻唑蓝(MTT)该检测各组HLE-B3细胞增殖活性,流式细胞仪检测各组HLE-B3细胞凋亡。细胞划痕实验检测细胞迁移。Western印迹检测各组HLE-B3细胞中细胞周期蛋白(Cyclin)D1、细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(P21)、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达。结果 在H_2O_2诱导的HLE-B3细胞中LncRNA OIP5-AS1表达明显上调,miR-150-5p表达明显下调(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验表明,LncRNA OIP5-AS1靶向负调控miR-150-5p表达。抑制LncRNA OIP5-AS1表达,可以显著抑制H_2O_2诱导的HLE-B3细胞凋亡,明显促进细胞增殖与迁移(P<0.05)。抑制miR-150-5p表达可以明显逆转抑制LncRNA OIP5-AS1对H_2O_2诱导的HLE-B3细胞凋亡的抑制作用(P<0.05)。结论 LncRNA OIP5-AS1在H_2O_2诱导的HLE-B3中上调表达,抑制LncRNA OIP5-AS1表达,可明显上调miR-150-5p表达,从而抑制H_2O_2诱导的HLE-B3细胞凋亡,促进细胞增殖与迁移。
关键词:长链非编码RNAOpa相互作用蛋白5反义转录物(OIP5-AS)1;;微小RNA(miR)-150-5p;;氧化应激;;人晶状体上皮细胞;;增殖;;凋亡;;迁移
基金资助:河南省医学科技攻关计划软科学项目(LHGJ20220588)