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作者:梁殿迅;李和丽;朱军义;许静;郭哲;孙慧霞;吕红珂;
单位:南阳市中心医院;
摘要:目的 探究miR-103靶向调节同源性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)对卵巢癌(OC)细胞增殖和凋亡的影响。方法 体外培养人正常卵巢细胞KGN及卵巢癌细胞SW-626、COC1、OVCA432、A2780细胞,利用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定KGN、SW-626、COC1、OVCA432、A2780中的miR-103表达量。将SW-626细胞分为阴性对照组、miR-103 mimics组、miR-103 mimics+pcDNA3.1组、miR-103 mimics+pcDNA 3.1-PTEN组和对照组,使用细胞计数试剂盒(CCK)-8法检测细胞存活情况,利用流式细胞仪检测凋亡率,双荧光素酶报告基因验证miR-103与PTEN的靶向关系,Western印迹检测PTEN、增殖蛋白增殖细胞核抗原(ki)-67及凋亡蛋白B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶(caspase)-3蛋白表达水平。结果 与KGN相比,SW-626、COC1、OVCA432、A2780细胞中miR-103显著高表达(P<0.05),SW-626细胞中miR-103相对较高;与对照组、阴性对照组相比,miR-103 mimics组SW-626细胞miR-103表达水平、增殖能力、ki-67、Bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.05),PTEN表达水平、凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达显著降低(P<0.05);与miR-103 mimics组和miR-103 mimics+pcDNA3.1组相比,miR-103 mimics+pcDNA3.1-PTEN组SW-626细胞增殖能力、ki-67、Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05),PTEN表达水平、凋亡率、Bax、caspase-3蛋白表达显著升高(P<0.05)。PTEN是miR-103的直接靶点,miR-103负调控PTEN表达(P<0.05)。结论 miR-103在SW-626细胞中高表达,可以促进SW-626细胞增殖并抑制其凋亡,可能作用机制是靶向调控PTEN,为OC靶向治疗提供理论基础。
关键词:miR-103;;PTEN;;卵巢癌;;增殖;;凋亡
基金资助:河南省医学科技攻关项目(172103210067)