来源：期刊VIP网 时间：
作者：田玲玲;陈松;罗志辉;闫鹏;
单位：荆州市第二人民医院;湖北中医药大学针灸骨伤学院;
摘要：目的 观察柚皮苷通过激活盒转录因子(SOX)9通路对骨关节炎软骨破坏的保护作用及其机制。方法 体外分离培养SD大鼠关节软骨细胞。用白细胞介素(IL)-1β将其诱导成炎性环境，以模拟骨关节炎。根据不同的干预方法分为空白(Con)组、模型(Mo)组、柚皮苷(NG)组和塞来昔布(Celeb)组，通过噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性；实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western印迹和免疫染色检测相应的软骨表型SOX9、Ⅱ型胶原(COL-Ⅱ)和蛋白多糖(Aggrecan)、细胞外基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-13表达；酶联免疫吸附试验(ELISA)炎症相关因子(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。体内实验将20只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、柚皮苷组和塞来昔布组各5只。手术造模后进行灌胃，8 w后取材进行病理染色和免疫组化评估。结果 软骨细胞在3 d时呈三角形或多边形；经免疫荧光染色COL-Ⅱ,证明分离的细胞确为软骨细胞。经IL-1β干预后，软骨特异性相关基因(SOX9、COL-Ⅱ和Aggrecan)均显著降低，MMP-1、MMP-13均显著升高(P<0.01)。NG组与Celeb组均可明显缓解因IL-1β造成的炎性环境和细胞外基质破坏(P<0.05,P<0.01),且NG组明显优于Celeb组(P<0.05)。经IL-1β处理后，SOX9、COL-Ⅱ和Aggrecan蛋白表达量显著下降(P<0.01)。NG组与Celeb组均可显著逆转炎症的持续恶化(P<0.05,P<0.01)。总体NG组优于Celeb组(P<0.05)。与Con组比较，Mo组IL-1β和TNF-α水平均显著升高(P<0.01)。与Mo组比较，NG组和Celeb组IL-1β和TNF-α水平均显著降低(P<0.05)。与NG组比较，Celeb组略有升高但无显著变化(P>0.05)。免疫染色和病理切片染色可知，Mo组SOX9、COL-Ⅱ和Aggrecan表达和组织完整性均显著下降(P<0.01),NG组和Celeb组能明显逆转软骨持续退变(P<0.05,P<0.01),骨关节炎研究学会(QARSI)评分柚皮苷组明显优于塞来昔布组(P<0.05)。结论 柚皮苷可通过激活SOX9信号通路有效保护骨关节炎软骨破坏。
关键词：骨关节炎;;柚皮苷;;软骨细胞;;骨碎补
基金资助：国家中医药管理局全国名老中医药专家传承工作室建设项目(国中医药人教函[2022]75号);; 湖北省青年英才开发计划项目(鄂青联发[2020]1号)
