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作者：井刚;邝少加;梁萍;王君;
单位：海南省人民医院烧伤与皮肤修复外科;
摘要：目的 探讨过表达miR-133b大鼠表皮干细胞外泌体对烧伤大鼠病原菌及创面愈合的影响。方法 采用过表达miR-133b的慢病毒颗粒(LV-miR-133b)和阴性对照(LV-NC)转染大鼠表皮干细胞，并从LV-NC或miR-133b转染的表皮干细胞中分离外泌体，采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测表皮干细胞及其外泌体中miR-133b的表达量；建立大鼠烧伤模型，分为NC-Exos组和miR-133b-Exos组，每组24只，在烧伤大鼠在伤口周围分别注射100μg外泌体(NC-Exos和miR-133b-Exos),每7天注射1次，共3次。在烧伤后每天采用咽拭子收集创面分泌物，将创面分泌物进行细菌培养，计数；在烧伤后第0、7、14和21天，观察两组烧伤创面，计算创面愈合率；采用苏木素-伊红(HE)染色法检测创面组织的病理学变化并进行组织学评分；采用免疫荧光法检测创面组织中CD31阳性表达并计算微血管密度。结果 与LV-NC组相比，LV-miR-133b可显著提高大鼠表皮干细胞及其外泌体中miR-133b mRNA水平(P<0.05)。在烧伤后第0天，NC-Exos组创面分泌物出现细菌生长；在烧伤后第7天，miR-133b-Exos组创面分泌物出现细菌生长。在烧伤后第7、14、21天，与NC-Exos组相比，miR-133b-Exos组创面分泌物的细菌数显著降低(P<0.05);与NC-Exos组相比，miR-133b-Exos组创面愈合率显著升高(P<0.05)。烧伤后第7天，与NC-Exos组相比，miR-133b-Exos组创面组织中可观察到大量表皮细胞，肉芽组织，毛细血管等，少量的炎性细胞。烧伤后第14、21天，与NC-Exos组比较，miR-133b-Exos组创面组织学评分显著增加(P<0.05);miR-133b-Exos组创面CD31表达均呈现强阳性，创面微血管密度均显著增加(P<0.05)。结论 过表达miR-133b大鼠表皮干细胞外泌体可显著抑制烧伤大鼠创面细菌生长，进而促进烧伤大鼠创面愈合。
关键词：miR-133b;;外泌体;;烧伤;;病原菌;;创面愈合
基金资助：海南省教育厅项目资助(Hnky2023-28);; 海南省重点研发基金项目(ZDYF2023SHFZ123)
