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作者：王博;曲修胜;
单位：佳木斯大学附属第一医院肿瘤综合科;
摘要：目的 miR-99b-5p对结肠癌细胞增殖迁移的影响及其机制的探讨。方法 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测结肠癌组织样本和结肠癌细胞系HCT116、HCT8和HCT29中miR-99b-5p表达。将miR-99b-5p-mimics和mimics-NC转染至HCT29细胞中。分为NC组(未进行转染细胞)、阴性对照组(mimics-NC组)和过表达组(mimics-99b-5p组)。以5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EDU)、集落形成、小室迁移实验、划痕实验和Western印迹实验检测3组细胞增殖和迁移能力。R语言验证miR-99b-5p在结肠腺癌(TCGA-COAD)中的表达趋势。数据库预测miR-99b-5p下游靶基因。基因本体论(GO)/京都基因和基因组百科全书(KEGG)分析下游靶基因的生物学功能和富集信号通路。结果 miR-99b-5p在结肠癌组织和细胞系中明显低表达(P<0.05)。低表达的miR-99b-5p与结肠癌的肿瘤直径及分化程度存在相关性(P<0.05)。过表达miR-99b-5p后结肠癌细胞的增殖和迁移能力明显下降，基质金属蛋白酶(MMP)-9、增殖细胞核抗原(PCNA)、波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(Cadherin)蛋白和mRNA、Ki67蛋白水平显著降低，而E-Caderin蛋白和mRNA水平明显增加(P<0.05)。数据库预测miR-99b-5p下游靶基因为51个，GO分析靶基因的生物学功能。KEGG分析发现，靶基因主要富集在丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中。结论 miR-99b-5p负调控结肠癌细胞的增殖和迁移。miR-99b-5p可能参与上皮间质转化(EMT)进程影响结肠癌转移。miR-99b-5p可能是通过MAPK信号通路来影响结肠癌的发生发展。
关键词：miR-99b-5p;;结肠癌细胞;;上皮间质转化(EMT);;丝裂原活化蛋白激酶(MAPK);;信号通路
