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作者：符厚圣;王飞;王为服;康新立;
单位：海南省人民医院(海南医科大学附属海南医院)泌尿外科;
摘要：目的 探讨长链非编码(Lnc)RNA母系表达基因(MEG)3靶向调控微小RNA(miR)-424-5p/ABL家族非受体酪氨酸激酶(ABL)2轴对前列腺癌(PCa)细胞系LnCaP细胞生物学行为的影响。方法 体外培养人正常前列腺上皮细胞系RWPE-1、PCa细胞系PC3、DU145、LnCaP、22RV1,实时荧光定量PCR法检测各细胞系中LncRNA MEG3、miR-424-5p和ABL2 mRNA表达水平。将培养至对数生长期的LnCaP细胞分为对照组(常规培养LnCaP细胞)、LncRNA MEG3-NC组(LnCaP细胞转染LncRNA MEG3空载质粒)、LncRNA MEG3组(LnCaP细胞转染LncRNA MEG3重组质粒)、LncRNA MEG3+miR-NC组(LnCaP细胞转染LncRNA MEG3重组质粒和miR-424-5p空载质粒)、LncRNA MEG3+miR-424-3p组(LnCaP细胞转染LncRNA MEG3重组质粒和miR-424-5p模拟物质粒)。实时荧光定量PCR法检测各组LnCaP细胞中LncRNA MEG3、miR-424-5p和ABL2 mRNA表达水平；双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA MEG3与miR-424-5p的靶向关系及miR-424-5p与ABL2的靶向关系；细胞计数试剂盒(CCK)-8、5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)法、流式细胞术和Transwell实验分别检测各组LnCaP细胞活力、细胞增殖水平(EdU阳性细胞率)、凋亡率和侵袭数目；Western印迹法检测各组LnCaP细胞中ABL2蛋白表达水平。结果 与人正常前列腺上皮细胞系RWPE-1相比，PCa细胞系(PC3、DU145、LnCaP和22RV1)中LncRNA MEG3、ABL2 mRNA表达水平显著降低，miR-424-5p表达显著升高(P<0.05);与对照组和LncRNA MEG3-NC组相比，LncRNA MEG3组LnCaP细胞中LncRNA MEG3、ABL2 mRNA和蛋白表达、凋亡率显著升高，miR-424-5p表达、细胞活力、EdU阳性细胞率和侵袭数目显著降低(P<0.05);与LncRNA MEG3组和LncRNA MEG3+miR-NC组相比，LncRNA MEG3+miR-424-3p组LnCaP细胞中LncRNA MEG3表达差异无统计学意义(P>0.05),miR-424-5p表达、细胞活力、EdU阳性细胞率和侵袭数目显著升高，ABL2 mRNA和蛋白表达、凋亡率显著降低(P<0.05);LncRNA MEG3可靶向调控miR-424-5p; miR-424-5p可靶向调控ABL2。结论 LncRNA MEG3可靶向调控miR-424-5p/ABL2轴抑制LnCaP细胞活力、增殖和侵袭，促进其凋亡。
关键词：长链非编码RNA母系表达基因3;;微小RNA-424-5p;;ABL家族非受体酪氨酸激酶(ABL)2;;前列腺癌;;生物学行为
基金资助：海南省重点研发计划项目(ZDYF2021SHFZ096)
