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作者:周曼丽;翟宗岗;王振静;
单位:南阳市第一人民医院ICU;南阳市第一人民医院呼吸与危重症医学一科;河南省胸科医院呼吸内镜中心;
摘要:目的 探讨丝切蛋白(Cofilin)-1在巨噬细胞中抗铜绿假单胞菌感染的作用及其机制。方法 常规培养并用佛波酯诱导人巨噬细胞系(THP)-1,随机分为空白对照组、空质粒转染组、Cofilin-1转染组,每组设置20个复孔。Western印迹检测Cofilin-1蛋白表达;原位末端标记法(TUNEL)检测巨噬细胞凋亡情况;酶联免疫吸附试验测定巨噬细胞上清液中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;将3组巨噬细胞加入铜绿假单胞菌溶液中,分别于培养6、12、24、48、72 h时计数菌落数量。结果 Cofilin-1粒转染组巨噬细胞中Cofilin-1蛋白表达明显高于空白对照组、空质粒转染组(P<0.01)。随着培养时间增加巨噬细胞凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α水平逐渐提升,铜绿假单胞菌菌落数逐渐增加,培养24、48、72 h时Cofilin-1转染组巨噬细胞凋亡率、铜绿假单胞菌菌落数明显低于空质粒转染组、空白对照组,培养12、24、48、72 h时Cofilin-1转染色组IL-1β、IL-6、TNF-α水平明显高于空质粒转染组、空白对照组(P<0.05)。结论 Cofilin-1蛋白能够有效抑制铜绿假单胞菌菌落数的增加,发挥抗铜绿假单胞菌的作用,可能与抑制巨噬细胞凋亡、促进炎性细胞因子分泌来实现。
关键词:巨噬细胞;;铜绿假单胞菌;;丝切蛋白(Cofilin)-1;;白细胞介素-1β;;白细胞介素-6;;肿瘤坏死因子α
基金资助:河南省医学科技攻关计划联合共建项目(LHGJ20191453)