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作者：赵磊;刘洋;凌李维;柳鑫燕;赵渝;吴浩;
单位：上海市质量监督检验技术研究院国家市场监督管理总局重点实验室(乳及乳制品检测与监控技术);上海师范大学生命科学学院;复旦大学人类表型组研究院复旦大学微生物组中心;
摘要：益生菌发酵乳是益生菌市场发展的重要赛道，精确定量产品中活性益生菌对保障其营养功能至关重要。文章以嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)和动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)为研究对象，采用种特异性引物和探针，结合叠氮溴化丙锭(propidium monoazide, PMA)染色，基于芯片式数字PCR技术建立了发酵乳中活性益生菌的三重定量检测方法。结果表明，3组引物和探针均能特异性扩增目标菌株，无交叉反应，且20μg/mL的PMA能够有效抑制嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和动物双歧杆菌死菌DNA的扩增。该检测方法对嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和动物双歧杆菌的灵敏度分别为1.65、2.20、2.16 copies/μL,重复性检测的相对标准偏差为1.52%～8.69%,成功实现了对发酵乳中3种常见益生菌的活菌定量检测。为益生菌发酵乳中活菌检测的标准化提供了技术支持和科学依据。
关键词：发酵乳;;PMA;;种特异性;;芯片式数字PCR
基金资助：国家市场监督管理总局技术保障专项项目(2023YJ16)
