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作者：宋丹丹;顾思雨;宋春华;葛峥;
单位：东南大学附属中大医院血液科,东南大学血液病研究所;Pennsylvania State University,College of Medicine and Hershey Medical Center;Division of Hematology,The Ohio State University,Wexner Medical Center and The James Cancer Hospital;
摘要：目的:探索Bcl-2抑制剂维奈克拉(VEN)联合组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂西达本胺(CDM)在急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)中的协同抗白血病作用及其可能的作用机制。方法:CCK-8实验检测VEN、CDM单药及联合用药对T-ALL细胞系CEM和MOLT-4细胞增殖的影响，流式细胞术检测VEN、CDM单药及联合用药对T-ALL细胞周期、细胞凋亡的影响，Western blot法检测细胞周期及凋亡相关蛋白的表达。通过网络药理学分析筛选VEN联合CDM在T-ALL中的关键作用通路，并在T-ALL细胞系、T-ALL患者原代细胞及公共数据库中进行验证。结果:VEN联合CDM具有协同抑制CEM和MOLT-4细胞增殖的作用。在细胞周期实验中，VEN联合CDM可诱导CEM和MOLT-4细胞G_0/G_1期阻滞，Western blot显示VEN联合CDM能显著下调cyclin E2和CDK2的表达，上调p21~(Waf1/Cip1)的表达。在细胞凋亡实验中，VEN联合CDM可显著诱导CEM和MOLT-4细胞凋亡，Western blot检测结果显示，VEN联合CDM通过下调Mcl-1、上调Bax和cleaved caspase-3促进细胞内源性凋亡。网络药理学分析筛选出10个关键节点基因，KEGG富集分析显示显著富集于cell cycle、PI3K-AKT信号通路及其下游FoxO信号通路。GO富集分析显示显著富集于G_1/S transition of mitotic cell cycle、cyclin-dependent protein kinase holoenzyme complex和kinase activity。Western blot显示VEN联合CDM在CEM和MOLT-4细胞中显著下调PI3K、AKT、p-AKT,上调FoxO1。FoxO1在T-ALL患者细胞中低表达，在GSE13159和GSE26713数据集中验证显示了同样的结果。结论:VEN联合CDM通过调控PI3K/AKT/FoxO1轴，抑制细胞增殖、诱导G_0/G_1期阻滞和促进细胞凋亡，发挥协同抗T-ALL作用。
关键词：维奈克拉;;西达本胺;;急性T淋巴细胞白血病;;FoxO1
基金资助：国家自然科学基金(82070166);; 江苏省卫健委重点项目(ZD2021003);; 江苏省医学重点学科(JSDW202212)
