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作者:戴志晨;凌玲;杨兰;杨帆;龚方煜;郁多男;
单位:扬州大学医学院/江苏省非编码RNA基础与临床转化重点实验室;扬州大学医学院附属扬州市妇幼保健院;
摘要:目的:研究micro RNA-709(miR-709)在红细胞发育中的作用及其与多种临床血液疾病的相关性。方法:通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-709在小鼠多种组织中的表达情况;通过转录组芯片分析的方法检测miR-709与其他miRNA在小鼠14.5 d胚胎肝细胞中的表达情况;通过磁珠分选和qRT-PCR检测miR-709在小鼠骨髓、脾脏来源的有核红细胞和外周血中的表达情况;通过细胞培养和qRT-PCR检测miR-709在小鼠红白血病(MEL)细胞向红系分化过程中的表达情况;通过磁珠分选、流式细胞术(FCM)检测、细胞培养和qRT-PCR分析miR-709在小鼠胚胎肝来源的红系前体细胞向红系定向分化过程中的表达情况;通过qRT-PCR检测miR-709在多种临床血液疾病患者外周血中的表达情况。结果:在小鼠的多种组织中,miR-709在外周血中表达量最高,其次在肌肉、骨髓和肝脏中高度表达;在小鼠14.5 d胚胎肝细胞中miR-709高度表达,远高于在成熟红细胞中表达水平最高的miR-451;在小鼠骨髓、脾脏来源的有核红细胞中,miR-709的表达高于miR-451,在外周血中则相反。在小鼠胚胎肝来源的红系前体细胞向红系分化的过程中,miR-709的表达水平先增加,然后降低;在MEL细胞向红系分化的过程中,miR-709的表达水平逐步升高。与健康对照组相比,骨髓增生异常综合征(MDS)、α-地中海贫血和β-地中海贫血患者外周血中miR-709表达水平降低,感染性溶血性贫血(IHA)患者中miR-709表达水平升高。结论:miR-709在红细胞发育前期高度表达,且在红系发育的过程中呈动态变化,可能发挥着重要作用,其在不同的血液疾病中也存在表达差异,有望在临床血液疾病的诊治中作为重要的生物标志物和治疗靶点。
关键词:miR-709;;MEL细胞;;红系分化;;血液疾病
基金资助:国家自然科学基金面上项目(81870096)