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中国实验血液学杂志2025年第06期:京尼平血紫蛋白交联纳米粒的构建及体外测试

来源:期刊VIP网 时间:


作者:黄志华;苏谐;赵会民;

单位:广西医科大学第二附属医院急诊科;广西医科大学第二附属医院血液内科;广西医科大学第二附属医院创伤中心;

摘要:目的:探索天然交联剂京尼平修饰血紫蛋白分子的可行性,并评价其有效性和安全性。方法:以切向流超滤法从星虫中分离提纯血紫蛋白,随后分别在弱酸性条件下加入20%质量京尼平构建京尼平交联血紫蛋白纳米粒(GHrNP)、在弱碱性条件下加入10%质量戊二醛构建戊二醛交联血紫蛋白纳米粒(GAHrNP),检测两组纳米粒直径、分散指数、Zeta电位、功能基团结构、P_(50)及Hill系数。将不同质量浓度的两组纳米粒与血管内皮细胞共培养24 h后,检测血管内皮细胞存活率及培养液中NO浓度。结果:血紫蛋白经戊二醛/京尼平交联后,红外光谱显示酰胺键谱带Ⅰ与Ⅱ持续存在,血紫蛋白、GHrNP和GAHrNP水合粒径分别为(93.14±2.11)、(109.53±3.54)和(115.65±2.65)nm,分散指数分别为0.30±0.06、0.27±0.05、0.25±0.03,Zeta电位分别为(-24.00±1.54)、(-19.52±1.31)和(-18.90±1.25)mV,P_(50)分别为(9.28±0.22)、(8.50±0.54)和(5.75±0.90)mmHg, Hill系数分别为1.61±0.14、1.58±0.17和1.41±0.22;血紫蛋白交联后水合粒径增大,Zeta电位负值减小,GAHrNP与血紫蛋白、GHrNP相比P_(50)值减小(均P<0.05)。各质量浓度下GHrNP组血管内皮细胞的存活率均显著高于GAHrNP组(P<0.05),仅在高浓度(2.0 mg/ml)下GHrNP组的血管内皮细胞培养液NO浓度显著高于GAHrNP组(P<0.05)。结论:血紫蛋白分子经京尼平交联可以形成稳定的纳米粒,具备良好携氧活性,且细胞毒性较戊二醛交联更低。

关键词:血红蛋白氧载体;;血紫蛋白;;纳米粒;;京尼平;;戊二醛

基金资助:国家自然科学基金(82260047);; 广西自然科学基金项目(2023GXNSFAA026168);; 广西壮族自治区重点临床专科(创伤外科)研发专项(GKTS202203101)